原代养4天就传代

倒腾细胞

可是消化不顺利 很多没消下来 部分细胞甚至缩都不缩
5 d: T/ J' v9 i2 e  x0 b  L胰酶之前用着都还好啊0 D& P" `2 Y0 w) K7 F% {% n) E
不会是细胞在加油长加油贴壁吧 * m( W* c4 Q$ K) S2 u: i  U  ]
前辈们怎么看？

woshibotao_01

消化不好的话，先看看你的胰酶是不是在4度放的时间太长了影响消化效果。如果胰酶没问题，那你的细胞是不是除了MSC之外其他的杂细胞太多了？

daviddow

是培养的什么细胞呢?

夜光猫

血清没有洗干净吗？按照平时的时间消化不行的话，就放培养箱半分钟吧。这样也下不来的细胞八成是杂细胞或老化摊开了的细胞吧

倒腾细胞

回复 daviddow 的帖子% L2 L& @" g: }' P, U- B' l

$ \+ Y6 k& k8 z1 l前辈 是MSC  0 Y! C% U9 |" H1 g+ x6 @; U
今天消化 换了胰酶 感觉要好些了 但是很多细胞仍旧小不下来 我估计也就下不来了 不知道那是什么情况

倒腾细胞

回复 夜光猫 的帖子8 I0 ~3 h. l% `2 n
% ?5 G7 v$ c* h7 U! C/ j* T
哦？杂细胞也会贴的那么紧吗？但是看形态就是MSC　就是下不来2 ]4 R! z0 \. `& q( y
另外老化摊开的细胞都会缩的　然后下来

倒腾细胞

回复 夜光猫 的帖子2 G1 r! w. k# U3 H

( z3 Q5 ~7 V( N/ I; t: }0 q: Q前辈　你们会用老化摊开的细胞做后续实验么　　0 g: L: w* X) Z) o5 ?
师兄师姐说对细胞不要太高要求　客观条件有限　大概还是能用

suning5

胰酶时间长，失效

daviddow

回复 倒腾细胞 的帖子
- O1 w: p# h$ {; e" S0 V; i* F, D6 Z& ]' w( S) O0 n: C
MSC应该很好消化啊，不该难消化。是不是你分离的时候掺杂了其他的细胞？如果这样，那些细胞是不用考虑的

月_幻影

原代细胞的消化本身就比后面细胞传代时消化时间长一些，LZ加入胰酶后可以镜下观察消化情况，必要时可以拍打下培养瓶，根据镜下观察的情况终止消化就好。