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求助,想知道无血清培养干细胞会影响它细胞因子的分泌吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2015-6-28 16:55 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我在实验中因为想排除血清对干细胞分泌因子的干扰,所以以LG-DMEM(serum-free)培养干细胞24h后收集培养液作为conditioned media进行后续试验。但是看到一篇综述说无血清培养的时候,MSC的相关增殖通路会被激活,进而分泌一些促增值因子。不过就看到有这么一篇这么说,想知道大家对这方面有没有研究, 有没有什么建议?因为想做干细胞对肿瘤的生长的影响作用,但是没法确定始终,一会促进一会抑制的,整个要崩溃了
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沙发
发表于 2015-6-29 09:26 |只看该作者
回复 听不到 的帖子
9 ?3 f% g/ V" |4 G, R& x" V) T# q* I# ?
这个问题很有趣,回答起来既简单又复杂,1.简单的,你用什么培养基就如实写,得到的干细胞你打算做对肿瘤的影响也可以,只不过你必须清楚地说明你是在这一特定条件下得到的细胞对肿瘤生长的影响,这么做的结果可能与别人用其它条件培养得到的细胞做的结果缺乏严格的可比性;2.复杂的,不同培养基对所培养得到的干细胞有什么区别,研究很多,现在结果是有一些不同,但对结果的解读众说纷纭,还看不出极有说服力的结果,这个领域还没有发展到那么成熟。
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藤椅
发表于 2015-6-29 11:21 |只看该作者
你是做外泌体吗?

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板凳
发表于 2015-6-29 12:35 |只看该作者
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干细胞对肿瘤的生长的影响作用?这个范围太大了。我建议您缩小范围,比如做干细胞的分泌的细胞因子如VEGF,BDNF等对哪一种肿瘤的影响?
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报纸
发表于 2015-6-29 13:11 |只看该作者
本帖最后由 听不到 于 2015-6-29 13:11 编辑
. ?; [2 v+ b( [/ Y
8 u" A  t" C4 ?/ a1 N1 x回复 uslzhang 的帖子' _0 S% _4 m5 w& J, {" E: R

+ B9 a* ^5 a! \1 U8 P; B5 E- {唉,现在就是想赶紧做点结果出来赶紧毕业,所以肯定只能简单来说,不过又觉得像你说的这样缺乏严格的可比性最后不好说...愁死了。
. a/ A$ H, Q5 W不过你知道无血清培养的时候MSC的AKT通路啊,ERK通路会不会被激活码?因为就查到一篇,不确定可不可信
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地板
发表于 2015-6-29 13:11 |只看该作者
回复 孤野知—少帅 的帖子5 e8 z, o, m4 u3 Q$ ]& Y

% ]1 [' P) z5 H$ H不是,单纯看分泌因子相关

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发表于 2015-6-29 13:12 |只看该作者
回复 yuanyecat 的帖子: a# X6 w/ F, s, y( @
; T) V" N: K* T. t8 `, X2 J
做这个的太多了吧...我想找找有没有没做过的因子啊什么的

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发表于 2015-6-29 14:09 |只看该作者
回复 听不到 的帖子* u; M4 G% W- C) r' m

6 z1 V2 X3 E0 Z" ~( ]7 I为什么一定就要做这个AKT或EKT通路呢?你们课题组只做这方面的吗?
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发表于 2015-6-29 16:07 |只看该作者
回复 uslzhang 的帖子
3 \( p* t1 A- J. y; C$ z
. N  i9 k. j) p9 A. ^( p/ ~4 J) Y没有,因为如果是因为无血清导致MSC内部的这两个通路激活,然后分泌相关因子致使肿瘤增殖的,那就和MSC没什么关系了啊,我想找的是正常培养下MSC对肿瘤的影响,而不是某些特定条件导致MSC发生变化后,再研究其对肿瘤的影响。这样的话我就是本来想排除血清消耗的影响,结果反而是我自己又引入了变数
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发表于 2015-6-29 16:21 |只看该作者
回复 听不到 的帖子0 _: e% o9 o0 z% o( }' k. ?& D

' r  k7 ]/ c' I* V那就不要用无血清培养基制备干细胞样品嘛。
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