脐带血分离培养血管内皮祖细胞

meredith603

密度梯度离心----分离单个核细胞----计数10^7每孔（6孔板）----EGM2中，fibronectin上培养----2-4天后第一次换液----每两天换液----一到两周就可以看到EPC克隆了。
" p: N" m# w" ^6 H. }6 }- s这方面文章不要太多。。。。

meredith603

单个核细胞贴壁培养后，早期的贴壁细胞是不能形成血管的，有些人用这种细胞做实验，把它称为早期EPC，但是这不是真正的EPC。贴壁一周后形成的克隆形成细胞是晚期EPC，这才是真正的EPC。你查文献的时候可以用endothelial colony-forming cells (ECFCs)来查。

meredith603

如果是做血管再生实验，一般是用ECFC，也称作late outgrowth endothelial progenitor cells(EPCs) 或是blood-outgrowth endothelial cells(BOECs)，与early out growth EPC（CD14+CD45+，来源于髓系/单核细胞系，通过旁分泌方式参与血管再生）相区别。具体步骤可参考文献"Strikingly different angiogenic properties of endothelial progenitor cell subpopulations: insights from a novel human angiogenesis assay."和"Redefining endothelial progenitor cells via clonal analysis and hematopoietic stem/progenitor cell principals".