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淋巴细胞分离液使用   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-7-15 09:24 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问你们淋巴细胞分离液都只吸云雾层吗?有没有中间层全回收的?影不影响后期培养?
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沙发
发表于 2015-7-15 09:30 |只看该作者
我们都是要吸上下1cm左右,不影响培养的
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藤椅
发表于 2015-7-15 10:02 |只看该作者
本帖最后由 aochongyu 于 2015-7-15 10:05 编辑
7 M* L- `3 O* N9 ]- L" n
' n4 B# f% x9 T9 l$ d4 Y( }5 \主要还是吸取白膜层,白膜层厚的话肯定会吸取上下层一部分液体,下层液体吸取越多一般红细胞越多,但是不影响后期培养,红细胞会自己裂解
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板凳
发表于 2015-7-15 10:35 |只看该作者
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我们都是全收的,对培养没什么影响。其实对回收率也影响不大,主要还是血的质量~
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报纸
发表于 2015-7-15 10:52 |只看该作者
在手法熟练的情况下,尽量只吸白膜层,有些人怕单个核细胞损失,就尽量多吸点白膜层上下两层的液体,当然,这样会有血小板和红细胞等杂质,CIK是悬浮生长,所以有点杂细胞影响也不是很大,但是如果是DC的话,就会有影响,DC是贴壁生长,如果杂细胞多,会占据培养瓶底部空间,不利于DC贴壁,所以还是尽量纯化单个核细胞,杂细胞越少,越利于细胞的培养
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2015-7-15 10:58 |只看该作者
我们吸取上下0.5厘米,虽然没什么影响,但是还是越少越好
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金话筒 优秀会员

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发表于 2015-7-15 11:14 |只看该作者
当然是只取白膜层,但是手法限制,所以会吸到其他分离液。如果上层吸的过多会导致血小板过多,下层可能导致血细胞吸入。血小板大部分会洗掉,其余2~3天消失。基本不影响培养。
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发表于 2015-7-15 11:14 |只看该作者
白膜层内含有一定量的单个核细胞,做科研的话尽量只吸取白膜层,做临床可以上下层多吸,保证病人细胞能够尽可能的多回收。对后期培养基本没什么影响。
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发表于 2015-7-15 18:00 |只看该作者
1.尽量不要多吸白膜层上下的液体,尤其不要吸太多的细胞分离液,因为细胞分离液的密度本身就比单个核细胞略小,如果细胞分离液的含量过多,不利于全部单个核细胞的洗脱。5 `, d2 Y  G0 b; l/ Q2 E/ I
2.如果要想保证单个核细胞全部分离出来,想要吸取白膜层上下的液体,请尽量多分几个离心管,吸取的液体与新加的生理盐水比例最好不要超过1:1.8 Y( W/ d& v+ W  V; |( ]
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发表于 2015-7-16 11:20 |只看该作者
1.尽量多吸白膜层,如果吸了淋巴分离液过多的话,在离心的过程中会损失一部分细胞
  q' M) Y8 f0 O( P% @  D' I2.白膜层的细胞如果在淋巴分离液中比较多,就是离心的转数不合适,要尽快调整
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