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GIBCO 台盼蓝染液0.4%检测CIK细胞活率   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-7-16 16:35 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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CIK细胞培养,一个周期马上要告一段落,下面要进行细胞活性检测,我用的是GIBCO  台盼蓝染液0.4%染液,你们都是用的什么啊?用的时候是不是需要进行稀释成0.2%的啊,我老板告诉我们是用1滴cik细胞悬液和9滴的台盼蓝染液(不加稀释)!这样是不是不对啊?不明白
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沙发
发表于 2015-7-16 21:20 |只看该作者
稀释不稀释要看细胞浓度的,胎盘蓝也用不到那么多,我们最多1:1,我记得好像是计数板周边4个大方格加起来100个左右应该是计数最精确的。
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2015-7-17 09:03 |只看该作者
本帖最后由 gondobar 于 2015-7-17 09:06 编辑 & l4 n& L% A' n& a6 m, X! A6 I. c

2 X$ {6 y0 y6 B; ?  b0.4%就是成品的台盼蓝,不用稀释!配合样品当然是看样品浓度,在技术要求范围内即可。
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板凳
发表于 2015-7-17 09:30 |只看该作者
cik和0.4%台盼蓝进行1:1稀释,台盼蓝就变成0.2%的了。
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报纸
发表于 2015-7-17 09:55 |只看该作者
本帖最后由 aochongyu 于 2015-7-17 09:57 编辑 % p/ k0 V0 u9 F2 r, t' a& H

3 ]1 y, q# s* O9 u( Z我们用的是索莱宝的0.4%台盼蓝,我们先用生理盐水稀释1:1以后(具体我也不清楚,为何稀释),才与细胞悬液混合计数(当细胞悬液浓度很高时先几倍稀释悬液),我们是细胞计数仪计数
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地板
发表于 2015-7-17 10:35 |只看该作者
这个要看你的细胞浓度
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7楼
发表于 2015-7-18 09:56 |只看该作者
回复 cleargreat 的帖子
$ `% U) p9 C- p( u1 A; G
4 L' N/ @, |, D3 K" o: |对于细胞计数,胎盘蓝的浓度绝对不是重点,重点是最终计数时,细胞的浓度。/ T6 Y/ F$ m( u6 D
区别在于,胎盘蓝浓度过大有一些活细胞有可能也会被染色。7 j$ f1 S% X9 Z& A# @
但是,这个过程也没有那么快,一般配好体系加上样,马上就计数了。
7 z8 M% t& F9 \6 h9 ^另外,赤藓红的染色效果比胎盘蓝要好,朋友们可以买来试一下。
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8楼
发表于 2015-7-20 11:23 |只看该作者
不用稀释的吧,我们是台盼蓝跟细胞1:1染色的,问题不大。
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金话筒 优秀会员

9楼
发表于 2015-7-21 15:10 |只看该作者
0.4%的台盼蓝就是使用浓度。如果死亡细胞不多,以台盼蓝:细胞悬液=1:5——1:10的比例加入即可;二者加入的比例接近,因为死亡细胞耗染液,死亡细胞数少,染液加的多,背景色很深,不易辨识。细胞计数的标准密度以四个大方格在80——100个。
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10楼
发表于 2015-7-22 09:59 |只看该作者
teahouse0802 发表于 2015-7-18 09:56
- k& e, T2 R2 `1 ~/ {; r回复 cleargreat 的帖子% j2 J5 F" ]7 t
6 D( ?4 `. X& }! ]( e# E8 B% s
对于细胞计数,胎盘蓝的浓度绝对不是重点,重点是最终计数时,细胞的浓度。

0 s6 n  `$ d3 @7 F7 j9 K赤藓红,没有用过,能说一下比台盼蓝好在哪方面呢?
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