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GIBCO 台盼蓝染液0.4%检测CIK细胞活率   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-7-16 16:35 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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CIK细胞培养,一个周期马上要告一段落,下面要进行细胞活性检测,我用的是GIBCO  台盼蓝染液0.4%染液,你们都是用的什么啊?用的时候是不是需要进行稀释成0.2%的啊,我老板告诉我们是用1滴cik细胞悬液和9滴的台盼蓝染液(不加稀释)!这样是不是不对啊?不明白
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沙发
发表于 2015-7-16 21:20 |只看该作者
稀释不稀释要看细胞浓度的,胎盘蓝也用不到那么多,我们最多1:1,我记得好像是计数板周边4个大方格加起来100个左右应该是计数最精确的。
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藤椅
发表于 2015-7-17 09:03 |只看该作者
本帖最后由 gondobar 于 2015-7-17 09:06 编辑 9 |" C1 v8 {# k% P# ~  N
1 e+ C! d: E" B7 d% Q! T. T9 v
0.4%就是成品的台盼蓝,不用稀释!配合样品当然是看样品浓度,在技术要求范围内即可。
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板凳
发表于 2015-7-17 09:30 |只看该作者
cik和0.4%台盼蓝进行1:1稀释,台盼蓝就变成0.2%的了。
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报纸
发表于 2015-7-17 09:55 |只看该作者
本帖最后由 aochongyu 于 2015-7-17 09:57 编辑
! f( E, w  F9 \- R7 O1 [" v/ s0 O+ d3 T
我们用的是索莱宝的0.4%台盼蓝,我们先用生理盐水稀释1:1以后(具体我也不清楚,为何稀释),才与细胞悬液混合计数(当细胞悬液浓度很高时先几倍稀释悬液),我们是细胞计数仪计数
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发表于 2015-7-17 10:35 |只看该作者
这个要看你的细胞浓度
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7楼
发表于 2015-7-18 09:56 |只看该作者
回复 cleargreat 的帖子  c) W! D0 ~9 j  F1 n

3 V! ~4 J# G, b对于细胞计数,胎盘蓝的浓度绝对不是重点,重点是最终计数时,细胞的浓度。0 m/ c/ _) [' F. Z! q
区别在于,胎盘蓝浓度过大有一些活细胞有可能也会被染色。# u( K5 k0 s, q7 S  M5 u' `, \
但是,这个过程也没有那么快,一般配好体系加上样,马上就计数了。
0 Z" T1 u" V6 Y) z* F5 M9 T  V  f* u另外,赤藓红的染色效果比胎盘蓝要好,朋友们可以买来试一下。
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8楼
发表于 2015-7-20 11:23 |只看该作者
不用稀释的吧,我们是台盼蓝跟细胞1:1染色的,问题不大。
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金话筒 优秀会员

9楼
发表于 2015-7-21 15:10 |只看该作者
0.4%的台盼蓝就是使用浓度。如果死亡细胞不多,以台盼蓝:细胞悬液=1:5——1:10的比例加入即可;二者加入的比例接近,因为死亡细胞耗染液,死亡细胞数少,染液加的多,背景色很深,不易辨识。细胞计数的标准密度以四个大方格在80——100个。
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10楼
发表于 2015-7-22 09:59 |只看该作者
teahouse0802 发表于 2015-7-18 09:56
% b" a2 Y& W- G! W6 Q7 q# v& f回复 cleargreat 的帖子
  \. U* T( f2 j! s7 m+ b4 Q4 s4 b$ z6 e* h& I
对于细胞计数,胎盘蓝的浓度绝对不是重点,重点是最终计数时,细胞的浓度。

3 R. x! f; N. K/ m& N% A3 H赤藓红,没有用过,能说一下比台盼蓝好在哪方面呢?
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