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GIBCO 台盼蓝染液0.4%检测CIK细胞活率   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-7-16 16:35 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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CIK细胞培养,一个周期马上要告一段落,下面要进行细胞活性检测,我用的是GIBCO  台盼蓝染液0.4%染液,你们都是用的什么啊?用的时候是不是需要进行稀释成0.2%的啊,我老板告诉我们是用1滴cik细胞悬液和9滴的台盼蓝染液(不加稀释)!这样是不是不对啊?不明白
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沙发
发表于 2015-7-16 21:20 |只看该作者
稀释不稀释要看细胞浓度的,胎盘蓝也用不到那么多,我们最多1:1,我记得好像是计数板周边4个大方格加起来100个左右应该是计数最精确的。
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藤椅
发表于 2015-7-17 09:03 |只看该作者
本帖最后由 gondobar 于 2015-7-17 09:06 编辑 & o2 g- x* _" N
( }% g* V, I: d$ B3 t
0.4%就是成品的台盼蓝,不用稀释!配合样品当然是看样品浓度,在技术要求范围内即可。
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板凳
发表于 2015-7-17 09:30 |只看该作者
cik和0.4%台盼蓝进行1:1稀释,台盼蓝就变成0.2%的了。
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报纸
发表于 2015-7-17 09:55 |只看该作者
本帖最后由 aochongyu 于 2015-7-17 09:57 编辑
( q5 {, w$ H; d" a1 Y! H# q, J4 j$ A( o: [3 M& h+ a2 O9 [
我们用的是索莱宝的0.4%台盼蓝,我们先用生理盐水稀释1:1以后(具体我也不清楚,为何稀释),才与细胞悬液混合计数(当细胞悬液浓度很高时先几倍稀释悬液),我们是细胞计数仪计数
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发表于 2015-7-17 10:35 |只看该作者
这个要看你的细胞浓度
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7楼
发表于 2015-7-18 09:56 |只看该作者
回复 cleargreat 的帖子
6 n2 R' g/ n7 Z% Q$ s" o3 H
' `- S9 x- f/ O" S& y( P对于细胞计数,胎盘蓝的浓度绝对不是重点,重点是最终计数时,细胞的浓度。
8 `; e6 ~7 u( H1 j4 p, O4 x) ~: y区别在于,胎盘蓝浓度过大有一些活细胞有可能也会被染色。- e+ j' X6 q1 I' N" w0 D
但是,这个过程也没有那么快,一般配好体系加上样,马上就计数了。5 r7 O- K' k: s3 G+ s3 S; x8 O
另外,赤藓红的染色效果比胎盘蓝要好,朋友们可以买来试一下。
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8楼
发表于 2015-7-20 11:23 |只看该作者
不用稀释的吧,我们是台盼蓝跟细胞1:1染色的,问题不大。
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9楼
发表于 2015-7-21 15:10 |只看该作者
0.4%的台盼蓝就是使用浓度。如果死亡细胞不多,以台盼蓝:细胞悬液=1:5——1:10的比例加入即可;二者加入的比例接近,因为死亡细胞耗染液,死亡细胞数少,染液加的多,背景色很深,不易辨识。细胞计数的标准密度以四个大方格在80——100个。
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10楼
发表于 2015-7-22 09:59 |只看该作者
teahouse0802 发表于 2015-7-18 09:56
9 K0 }" w' N* l, w回复 cleargreat 的帖子
5 Y8 D) L' h2 a- `8 @; w
, @5 a$ I- t  R, U, t对于细胞计数,胎盘蓝的浓度绝对不是重点,重点是最终计数时,细胞的浓度。
5 i) T! h. W8 i7 p/ t' i1 W
赤藓红,没有用过,能说一下比台盼蓝好在哪方面呢?
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