CIK细胞运输损失太多

momoenn

由于其他实验室需要，将我们实验室正在培养的CIK冷链运输过去。在这边拿走的时候计算了密度、活率等，细胞状态很好，但是到那边实验室第二天再观察时，袋中出现了很多絮状物，密度也降低了很多。这是什么原因呢？有什么好的办法解决吗？

baby00000003

细胞成团了，吹散计数数量应该差不多，活率就不好说了，annexin／PI跑个流式看看吧～

momoenn

回复 baby00000003 的帖子- D8 }' m3 [, I
. |. @* I& d5 o+ a) F. F
主要是问问有什么好的解决办法吗

momoenn

这次运输，加了2%的血浆，情况改善比较明显，还是有细胞团，但是没有絮状了。活率记录是90%。拿过去之前记录是99%以上。

baby00000003

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90%也可以啦～( T9 Q5 @& x% w; U
习惯上是2%HSA＋PBS
; S  f: @+ E9 w+ }: F  ]) d5 ~/ D条件允许的话，也可以培养基运过去再离心

cheeray

里面加白蛋白。或者自体血浆，就能让细胞有营养、、

大少爷

目前你这份细胞没有更好的解决办法。以后转移细胞时，直接将在培养的细胞（细胞培养袋）发过去，不需要冷链运输，最好放在恒温冷藏箱，保证8度左右，通过航空运输，尽量缩短运输时间，到那边实验室后，在进行培养观察，补液，检测，收集。

免疫与细胞

: m, E+ e" u8 {& z9 I" ]
1 {; q1 P) v% @. i4 ?
首先，请不用担心，细胞运输途中生长状态水平下滑非常正常且无法避免，运输后活率90％已经非常不错，不会影响继续培养的。如果要最大程度保证细胞运输时细胞状态，可以从以下几个方面着手：1 J# o# h( P  t" ]
1.缩短细胞运送至处理间的时间间隔：细胞出发地制备完成后立即交运送人员运送，选择最快捷的运送路径，到达接收地后立即处理，没必要等到第二天吧。
- r$ `* U( _4 s; M+ @2.运送温度设定：运送的温度和时间存在紧密关联，运输时间长则相应运送温度低一些，下面是一点建议，仅供参考（1小时内可以送到就可以选择常温运输;2小时—4小时，选择8-15℃;4小时以外，选择4-8℃运输）。( Y0 x- b# K% }4 o9 I
3.运送保护液成分：顶楼上的同学（最好是一定浓度自体血清或FBS+培养基，PBS也可以，但只能维持渗透压。）6 Y! V3 g% O6 R6 A& ?. _& N
4.运送时注意事项：装有细胞容器需要在运送箱内固定；运送人员要注意提的时候保持平稳，不要剧烈晃动（如果提着箱子开心的蹦蹦跳跳的，一会就都被摇死了）；运送人员没事别随便打开看（放箱子里呢，放心，跑不掉的）；安检别过射线，请工作人员手工检查，等等（不全面，请大家补充）

momoenn

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0 B* M' ~2 z! m, K4 G! I
谢谢。

免疫与细胞

回复 momoenn 的帖子7 B+ [" a: [$ N2 e! ]

( o# d5 T" M* z你们做临床，还是做研究？