请教关于 H1和 H9的几个问题，关键词：死细胞，增值能力，单细胞不形成克隆团。

缥飘实验员

最近培养的 H1 发现，传代活率控制在95-98%，选择单峰区间活率更高（TC-20 计数仪），24h 换液的时候有些死细胞正常，然后去 Y27632 ，48h 换液的时候没有 Y 的支撑也有很多死细胞，也正常，但是72h、96h、120h 的时候换液都还有很多死细胞，以前培养的 H1没有出现这样的情况，形成克隆团大概72h ，换液就几乎很少的死细胞，且增值能力比较差，基本上是6-7天才能传代，我觉得控制在4-5天传代合适些，每次换液我会刮除边缘细胞，去除边缘效应，换液都很温柔，培养基复温是室温10-20min，更换了培养基之后也发现死细胞很多，增值能力慢，还请各位老师帮我分析一下。
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4 n7 M% k: t: o" s$ Q关于 H9在 feeder 上培养，然后采用克隆团的方法转到 matrigel 上培养，在 matrigel 上克隆团形成边缘比较松散，不知道正否正常。再次传代的时候使用 TrypLE 消化成单细胞培养在 matrigel 上，D2-D3会形成小细胞聚集体，但是往后很难形成典型的克隆团，呈现胞体很大的单细胞的富集。对于细胞形态不形成克隆团的问题在此像各位求助分析。谢谢！

缥飘实验员

命名的图片没有名字，好像失败了。第一二图是 H1培养近态，往后依次为H9培养近态，H9 在 feeder 上培养使用克隆团发传代到 matrigel，再次单细胞传代到matrigel，single cell 在 matrigel 细胞富集不形成克隆团。& l* X8 c* y. E2 B2 c; C, d; O$ Y( g
谢谢各位了！

缥飘实验员

回复 开心果王 的帖子
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H1 是 stem cell 的 mTeSR1 ，H9 feeder是上海中科院的配方。H9 single cell 和 H1 是一个培养体系

缥飘实验员

回复 刘小明 的帖子& Z9 z3 K$ c2 L& R6 Q& }& G; s
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然后呢😄

缥飘实验员

回复 上官轩伦 的帖子
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具体什么问题，看看能不能帮到你