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楼主: 免疫与细胞
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免疫细胞培养内毒素检测取样及合格标准   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-8-12 10:19 |显示全部帖子
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在《中国药典》上规定对于待检样品要做干扰试验,对于样本类型的问题,可以做个干扰试验看看,如果细胞液没有干扰的话可以选择细胞液作为样本类型的,有干扰的话就要另作考虑生理盐水是否合适;至于内毒素检测阳性指标,这个是有公式计算的,不过需要注意的是,取值的时候一般要比计算值严格2-3倍,比如计算出来是1.5EU/mL,而我们实际操作的时候会取0.5EU/mL。对于何时取样的问题,我们一般是在冻存和细胞回输之前取样,从我们的经验来看,内毒素的超标比例还是很小很小的,没必要在培养过程中就取样,有点浪费幺
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沙发
发表于 2015-8-12 14:22 |显示全部帖子
可以在最后一步离心的时候取一些上清液做内毒素检测的;如果你样品多可以像你说的从最终产品里面取(0.9%生理盐水重悬的细胞液)样,我以前做的有细胞也没事啊,先做个干扰试验确定一下,应该没事
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藤椅
发表于 2015-8-12 14:26 |显示全部帖子
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7 N. x8 N  l' }$ d7 W( N) f
/ L& a! @% L' a# O如果回输的样品做内毒素检测有干扰怎么办啊?
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板凳
发表于 2015-8-17 15:54 |显示全部帖子
回复 元杰5 的帖子/ k5 ], ^5 V1 F( @! ]
+ `- E+ z- v3 Z5 Z, s
有些人回输细胞会加入其他的一些蛋白类的添加剂,按照你的说法,检测的和回输的完全一样的理论,但是加了蛋白以后就有干扰了,这种情况您是怎么处理呢?
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报纸
发表于 2015-8-17 16:01 |显示全部帖子
回复 免疫与细胞 的帖子
& i# p2 K, G# k
* d& H4 N) m. ^, y如果生理盐水洗涤降低了样品内毒素水平岂不是更好,如果细胞多的话可以取细胞(生理盐水)悬液,没问题的,我做过,没干扰!此外即使生理盐水上清不能完全表示样品里的内毒素水平,但是也应该近似吧,不会差很多,之前已经说了,我们的标准比实际计算的标准严格3倍呢,我觉得这个在可接受的范围内!如果你的细胞很珍贵,那么采用这种方法可以提高回收率啊
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地板
发表于 2015-8-18 11:08 |显示全部帖子
回复 元杰5 的帖子
6 M- S& Q/ P) a4 A$ a5 V0 ^  A+ v! |  r( {. D& r' q; C* l+ y
如果是这样的话,采用光度测定法是不是会好些呢?还会有干扰等因素的影响吗
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