免疫细胞分离时有大量脂肪

小刘

分离单核细胞时，白膜层有大量脂肪，影响后续实验吗？

CART

我的目标是T淋巴细胞，分离出单核细胞后还有经过多步的分离纯化，到后面脂肪团就没了，没影响。

a123567

如果需要扩大培养，从培养瓶转入培养袋，在分离时脂肪较多，将会影响吹洗贴壁细胞，很难洗脱下来。

免疫与细胞

影响，抽血时一定要嘱咐空腹，这样就不会有脂肪了

baby00000003

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如果全血离心时多用PBS洗几次，这种脂肪颗粒会不会慢慢就没有了？

CART

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. \+ r1 Q. i7 r5 ~% `# i% t分离时我是严格按照淋巴细胞分离液的说明书操作的，说明书是几次就几次，没有自己调整。建议淋巴细胞分离液用进口的，我用的是Sigma的，好的还有罗氏的，买不起啊

baby00000003

回复 CART 的帖子8 Q  v1 b4 d4 K6 K  O
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说到分离液，自己用hespan＋ficoll，分步加入效果也不错哟～" i6 j  v- X! y+ ^# {5 [
感觉hespan是需要一定时间包裹红细胞的～

cheeray

多用生理盐水洗涤。。看看效果。

鸵鸵

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生理盐水和PBS洗涤有什么区别吗？哪个更好用

老姜

分离细胞时有白膜层有大量的脂肪，对培养细胞的生长有影响。离心后脂肪常浮在血浆层的上方，这时应该用吸管将脂肪层吸弃，一般采用点状吸法尽量吸去脂肪，这时需将吸脂肪的吸管弃去，更换新管吸白膜层。