干细胞的复苏与冻存如何操作？

yooung

复苏时，感觉37度水浴温度有点低。我试验过从-80冰箱拿出装有1ml细胞悬液的冻存管放入37度水浴箱中到细胞悬液完全融化的时间为一分五十几秒到两分十几秒。由于冻存管的塑料材质有一定的隔热性，在37度水中水浴时，冻存管细胞悬液的实际温度会低于37度。我认为为了缩短融化时间，应该将水浴温度提高3~5度。

yooung

回复 fangtaoye 的帖子; h6 m8 R- E( [

  V# {5 \7 i) s* e0 S! B* @. u* I我们洗DMSO的时候的转速和时间和平常细胞离心的一样，1000rpm,5~7min。我认为洗DMSO时，还是从离心转速和时间对细胞最小伤害方面考虑，而不是怎样的离心转速和时间洗DMSO最干净方面。

yooung

回复 2014052 的帖子
- I8 p- h3 N1 h( _
! W  z; b! T+ D: R7 H; t; M2 e& m1.不用液相液氮罐，改用气相液氮罐，冻存的细胞不与液氮接触，就不会被支原体污染。
7 g2 b. r! W! {* [7 T( W4 H# C2.如果还是用液相液氮罐，可从冻存管密封上面来考虑，例如说，冻存管管口缠上封口膜之类。