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本帖最后由 panqiwei001 于 2015-9-1 13:08 编辑
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ESC 2015：三维心肌干细胞培养技术/ a1 l: t( y# X$ \$ }7 L v& A
2015-09-01 04:06 来源：丁香园
" ?0 }* V$ m. D4 W! w5 ] 体外细胞培养技术已成为细胞生物学药学、毒理学、干细胞、系统生物学和新药创制等领域必不可少的工具。传统平板细胞培养方法使细胞单层生长于二维环境，不能产生体内的细胞外基质屏障，且细胞表型也异于原代细胞。而三维细胞培养技术通过模拟机体内细胞生长的生理微环境，具有细胞培养直观性和条件可控性的优势，故其在再生医学应用方面有着非常大的发展潜力。% l1 C2 H: J8 J' Y' {
目前，有一种具有治疗心肌梗死前景的技术叫做外源性生物组织补片技术。理论上，可以利用该技术在体外构建工程化心肌组织，然后植入梗死的心脏。该技术可以攻克心肌成形术的一些缺点，如：细胞停留时间短、注入后细胞存活率低、心肌样细胞分化率低。细胞功能性融合等特点。2 P: m: m6 D3 W8 \, B
在此次 ESC 2015 大会上，来自上海心血管疾病研究所的白英楠等人使用心肌干细胞和介观水凝胶模型，在3D环境中培养 C-kit 阳性的小鼠心肌干细胞（CSC）以形成心脏组织补片。通过这种微制作组织模型（Nat Protoc．2009；4 (10)：1522–1534），制造出了个体化的组织网络和组织补片。( J: N4 {! @ k* ^* J0 X0 Y
其实验过程如下：
/ P9 q2 M6 R ^* s* [6 ^% O1. 分离 C-kit 阳性的CSC，传代培养。5 w$ \' y, g0 w2 g
2. 4万个CSC悬于5 mL 的去白血病生长因子干细胞培养基中培养，每2-3天换液一次。团块会在3-4天后形成。
0 ?- h! w/ n% @: S3. 然后将这些细胞与包含人工基底膜的纤维蛋白汇合加入微制作组织模型，以形成组织补片。" i4 r$ f2 O8 e* Z: N' F
4. 将每块补片进入含6-氨基己酸的无血清培养基中，在该培养基中培养14天，每两天换液一次。: X2 A# K1 P0 m7 l5 Y6 V
5. 14天培养之后，测试补片的功能。
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发表于 2015-9-1 13:06
