细胞培养出现絮状物

Anne_Yu

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我们做CIK培养，有些是采一回二的，然后在回完第一次，进行第二次培养的前几天会出现像这样的絮状物，据说是死细胞？这一份细胞絮状物特别多，但是在继续培养一段时间后，这些絮状物又会消失了。请问一下大家培养的时候会不会这样，这些絮状的东西是什么，后面又为什么会消失？

Anne_Yu

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# y3 e, Q% I; U7 p9 F. I8 y( {) t
嗯嗯，检测过了，细胞没有污染。

lm573713920

是细胞大量死亡才会这样，我们实验室有过这种问题。如果担心细胞污染的话，做一个快检内毒素，以防万一。

a276038921

这个东西有点像是，血浆中的不溶性蛋白 在培养基中析出 之后细胞粘附在表面上 就容易出现这东西 ，你下回可以观察一下血浆灭活后的絮状物 和你现在出来的这东西镜下观察很相识的
) c8 z+ \: E( p, J6 C0 i, b0 x4 y& ]

momoenn

可以考虑几个方面：& s; u1 c9 |6 }( X6 O4 [
1.分离出单个核细胞干净吗？杂细胞多吗？如果红细胞和粒细胞等杂细胞较多，在培养的过程中，这些细胞会死亡裂解，产生一些粘性物质粘附一些瓶里的细胞，形成絮状物；
  N& M- c+ A1 J3 v5 P2.看分离出的单个核细胞活率和活性，如果状态不好，照样会和第一条一样；" x- k6 C4 [, }+ O& d
随着培养时间的增加，新鲜培养基慢慢加入，CIK细胞增殖的越来越多，前期死亡的细胞造成的不良影响越来越小，自然就消失了。

海南小石

应该是死细胞。, Y" y2 w3 G; n" f' L

5 J. [' g6 r" A0 [/ g! ]# P  |采一回二的细胞和采一回一相比，本来就要难培养一些，细胞容易死亡。在留瓶培养的时候可能还不明显，但是用培养袋的培养效果不如培养瓶，转袋之后就有一些细胞会死亡。

312473313

回复 Anne_Yu 的帖子* F* @9 m" I, R* m7 z; I+ D

! ~. ]0 @: o) E+ Y  M6 ]5 Q第3天就发现了，细菌真菌内毒素支原体检测都没异常就没在意了，到后面长势明显差了很多

Anne_Yu

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; i, d, e% b4 j. M4 v) _1 j$ K& ]- s8 }
你是培养几天出现这种情况的？我们一般是在培养后期，尤其是第二次回输的时候这种情况比较严重，不过感觉细胞的长势没有受到太大的影响。

细胞海洋

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312473313

我在培养CIK过程中也遇到了一些看着透明的絮状物，显微镜下看里面像是很多细胞就没管正常操作了，后来慢慢减少了但是这份细胞长势却不好，养了十多天了还不如别人7天增殖的多，求高手指导，感谢！！