脐带间充质干细胞分离培养

babyrose66

做了两次脐带间充质干细胞的分离，用的是组织块贴壁的方法，步骤都是按照文献一步步来的，但是20多天，都没有细胞从组织块爬出，请各位大侠指点！拜托了

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回复 tingting2113 的帖子8 u* q) ~+ m, }1 p6 ^  i
' Z% C# B# U5 ]# Q8 \; n6 O
组织贴壁方法，脐带去除血管，华通胶剪碎，DMEM/F12，10%FBS培养,现在组织块都是飘着的 ，根本不贴壁，13天了，完全没有细胞爬出啊

babyrose66

回复 wuhuaguo88l 的帖子
0 g4 l; [0 w3 V! ]
1 y. f, C% n/ i组织很新鲜啊 ，4h内的，血清是GIBCO的，没问题，10cm培养皿加10ml培养基，多吗，组织块都在漂啊,十来天都没细胞，看的我好着急啊，需要加些因子吗/ \: k5 ~0 C0 s& L7 F1 Y

babyrose66

回复 edwardellen 的帖子3 Y+ G9 c2 j( }7 O! `# R2 w( ^) B

4 o. |/ V2 |  @3 V$ W& `3 D谢谢大侠，我再去做做看

babyrose66

回复 edwardellen 的帖子0 ^& d# E0 q- c
, p6 d6 M5 c2 c1 E* H
还有 就是在运输过程中，脐带都是浸泡在生理盐水加双抗中，大概2个小时左右，做之前也是哪pbs冲洗一下。之后也没有pbs反复冲洗，是和浸泡的时间长有关吗？

babyrose66

回复 月_幻影 的帖子6 n" [% I2 J/ c- ]) k% }3 }, J

6 @5 R  v3 R- ~倒置那么久或过夜，胶质会不会干了，亲

babyrose66

回复 20062926 的帖子3 D5 y( n, p1 J

: J3 X. T  I. q  U亲  什么因子也没用啊 ，你说的干贴壁法是指一点培养基都不加是吗？

babyrose66

回复 edwardellen 的帖子
6 Q0 q3 C: t3 L$ Q4 U. B  ?5 U8 r+ N' I/ F
gibco的进口胎牛血清啊 ，亲说的普通血清是哪样的啊* c! n( u" A- R* l( E4 R

babyrose66

回复 月_幻影 的帖子2 _; ?# x5 P  o+ I9 Y7 [: X4 {

7 `, ~- j9 i* J! J好的，谢谢大侠，大侠的培养基如何配置的，我用的DMEM/F12 ，FBS10%，1%双抗，这个培养基体系可以吗？

babyrose66

回复 20062926 的帖子
6 Z9 J6 e+ {. _& D0 g
( a% a1 ^2 n$ f( d6 E你们是啥培养基啊 ，咋那么神奇，能分享一下不