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细胞冻存 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-9-29 14:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教一下各位老师,不知为什么最近冻存细胞复苏后第二天都会出现白色团状物第三天就会基本消失,而且复苏后细胞增殖慢。不知道是什么原因?
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沙发
发表于 2015-9-29 14:57 |只看该作者
本帖最后由 tingting2113 于 2015-9-29 14:57 编辑 6 a" H% u# f! A+ R. g
8 u# s" n) l+ N% G
白色团状物是细胞吗?一般复苏第二天就换液的,换完还有吗?
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藤椅
发表于 2015-9-29 15:17 |只看该作者
是不是冻存的时候细胞没有充分吹散,所以解冻之后细胞仍有团团的。
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板凳
发表于 2015-9-29 15:31 |只看该作者
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一般团状物就是未吹散的脂肪,或者死细胞,你能确定细胞增殖慢跟这个白团有关系吗、
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报纸
发表于 2015-9-29 19:06 |只看该作者
要看你冻存的是什么细胞吧,不是所有的细胞都是这样的啊。至于和冻存体系之间有没有关系,暂时还不知道
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地板
发表于 2015-9-29 21:35 |只看该作者
你冻存的是什么细胞?冻了多久?液氮还是-80冰箱?
5 l, p$ }: Z6 I8 o" w冻存液用的什么?血清比例?血清是不是以前没用过的?血清质量如何?( P  S" }* Y$ W7 f
细胞在冻存的时候状态好不好?冻存时消化好了么?离心后是否重悬成单细胞?冻存的密度?9 M% t2 E0 U8 c% I* i' E; Z* h
复苏以后用的培养基和血清等试剂有没有更换?是不是以前用过好用的?) j% D) I2 R& {5 d' w
同时养的其他不是最近复苏的细胞状态有没有变化?同实验室的人有没有遇到类似问题?
; Z( e( ^9 F: Z" @) C3 A估计你这些问题你都核对一下,大概可以找到原因9 b& J+ O( {1 v; O( [
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发表于 2015-9-30 08:17 |只看该作者
可能是细胞冻存密度太高了,你冻存细胞密度是多少啊?若是MSC大约2-5*106吧
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金话筒 优秀会员

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发表于 2016-2-29 09:52 |只看该作者
可能原因很多,1.细胞死亡成团,核酸等絮状物释放;2.细胞密度过大;3.冻存液中蛋白类物质变性,聚集成团,或者与核酸等混在一起。
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