求助，CIK培养中出现的问题

lele

最近在用无血清养cik细胞，按照1*10^6/ml接种，第四天出现克隆球，计数活力80%左右，总数跟接种时总数相比，少了三分之一。第6天时克隆球出现聚集，粘连，计数结果显示活力和总数下降，较之前的一半。培养基用的X-15，因子用的进口的，培养箱检查过没有问题。不知道问题出现在哪里？各位大侠，请多多指教！

辉辉120

有可能是CD3比例加高了

本心

加点白蛋白

ch15594152551

具体没有操作，原因有很多

eeel

回复 lele 的帖子% B: D$ Z9 x6 t- K+ n
" X' ~: I. j3 O0 r4 j: ^
对因子最好是分装后尽快用完，保存条件好的最好在1-2月内用完，比较可靠

zhuliuming

我觉得是培养基的问题

3254938

你换了工艺么？之前养的怎么样，可以考虑换液试试，或者吹散加点自体血浆。。。

lele

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: D# B: J) S( v. r" `
( d1 P% N+ U% \) H2 f实验室有限，也就没拍照片

lele

回复 eeel 的帖子
1 @; q# u' z; `1 A% b* s" Z: S" G/ S9 Y3 j
若是因子失效或效价降低怎么办呢，因子本来就少，用什么检测效价
# ?, W9 A& n4 S0 J/ ^) Y; t呢

lele

回复 roosevelt9999 的帖子$ U: u* h7 z  T2 }$ A

8 J3 l' S1 n4 o# q* K六天时观察，成团的细胞，团与团之间出现了粘连，形成一坨。细胞吹散后计数，细胞总量和活力下来了。看到这种情况，也就没加液什么的。晃了一下瓶子又放回去了。