求助，CIK培养中出现的问题

lele

最近在用无血清养cik细胞，按照1*10^6/ml接种，第四天出现克隆球，计数活力80%左右，总数跟接种时总数相比，少了三分之一。第6天时克隆球出现聚集，粘连，计数结果显示活力和总数下降，较之前的一半。培养基用的X-15，因子用的进口的，培养箱检查过没有问题。不知道问题出现在哪里？各位大侠，请多多指教！

hwlightning

最好上个图片，一般有成团就不会出现这个问题！！！

醉心科研

X 15是什么？X VIVO吗？- C/ i, H- [2 m6 n# b" c
你对你的无血清培养基和因子很有信心啊，呵呵。是以前一直用的无血清吗，还是首次换无血清培养工艺？

roosevelt9999

除了培养基，因子和培养箱外，你还要问问这次病人采血之前是否服过什么抑制类的药物或者是打过什么升白针之类的。像你说的第六天有细胞团聚集，检测活力和数量减少？数量的减少是单个细胞了还是细胞团减少，活力下降，它自身有个选择适应的过程。这时可以添加自体血浆和减少加入培养基的量，把整个的细胞浓度控制一下，然后再培养观察

eeel

这个原因要考虑是养分不足或者因子的问题了 ，不如因子失效或者效价降低。

lele

回复 醉心科研 的帖子
9 `: I1 B, |2 J2 A) R% O! `+ @
8 ?. d  o7 J/ N7 Y+ n) k: ~1 qX 15以前没怎么用过，听说是培养免疫细胞最好的无血清了，还挺贵。

lele

回复 roosevelt9999 的帖子8 q- C" Q4 W6 V( {0 [5 J
8 E3 C9 n( u, _6 W
六天时观察，成团的细胞，团与团之间出现了粘连，形成一坨。细胞吹散后计数，细胞总量和活力下来了。看到这种情况，也就没加液什么的。晃了一下瓶子又放回去了。

lele

回复 eeel 的帖子1 @4 j5 @2 E: O+ N) u8 K
: G; E2 B# H4 N+ _! z5 _8 _/ t1 \
若是因子失效或效价降低怎么办呢，因子本来就少，用什么检测效价4 q: \" e# u8 g8 T  _4 J  g  l
呢

lele

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7 [/ _7 Z' `, }/ [6 w, y) P& S4 i* f, g# ^. c; A1 D7 L
实验室有限，也就没拍照片

3254938

你换了工艺么？之前养的怎么样，可以考虑换液试试，或者吹散加点自体血浆。。。