免疫荧光中，分别用PBS和封闭液洗一抗，有什么差别？ - 实验室综合讨论区干细胞之家

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楼主

发表于 2015-10-17 13:05 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

免疫荧光中，用PBS和封闭液洗一抗，两者之间有什么差别？对实验结果会产生什么影响？

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yeshch

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沙发

发表于 2015-10-18 08:33 |只看该作者

还真是第一次听说用封闭液洗一抗的，封闭液主要是用来封闭组织细胞中非特异性抗原，不知道是否能有效地洗出多余一抗；PBS倒是听说过，因为其对组织细胞渗透压和PH值的调节比较好，但是我们为了洗净非特异性，一般用PBST

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藤椅

发表于 2015-10-18 17:22 |只看该作者

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" O& n& g. E) k
用PBST效果比PBS要更好吗？背景更干净？之前还没用过PBST。

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yeshch

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板凳

发表于 2015-10-19 09:22 |只看该作者

是的，由于PBST中的吐温具有较好的洗涤作用，所以能把非特异性的洗得更干净

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报纸

发表于 2015-10-19 15:26 |只看该作者

回复 yeshch 的帖子2 R& q# O: a) l
# w( M7 C" C F Y7 G5 m
学习了，下次可以试下效果。

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xiaoxiaodeji

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地板

发表于 2016-1-15 10:12 |只看该作者

用PBST，PBS用的时候加些吐温

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jenny114402

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7楼

发表于 2016-1-31 10:32 |只看该作者

封闭液是在加一抗前用来洗细胞的，去除特异性结合，用PBST洗一抗。

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j1370033569

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小小研究员

8楼

发表于 2016-1-31 11:34 |只看该作者

0 y* ]$ B( U4 M+ v- G8 x, h8 t
封闭液是在加一抗前用来封闭膜上的蛋白吗？

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avbn

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9楼

发表于 2016-2-1 10:28 |只看该作者

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! r! z; w% L9 H8 ?& K
貌似PBST好一些，但是也用过PBS很长时间，感觉差别不大，具体试验方法还是要自己摸索

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121qwq

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10楼

发表于 2016-2-2 09:55 |只看该作者

封闭液洗一抗后，结果的背景会少很多

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