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[讨论] 免疫荧光中,分别用PBS和封闭液洗一抗,有什么差别? [复制链接]

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楼主
发表于 2015-10-17 13:05 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
免疫荧光中,用PBS和封闭液洗一抗,两者之间有什么差别?对实验结果会产生什么影响?
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沙发
发表于 2015-10-18 08:33 |只看该作者
还真是第一次听说用封闭液洗一抗的,封闭液主要是用来封闭组织细胞中非特异性抗原,不知道是否能有效地洗出多余一抗;PBS倒是听说过,因为其对组织细胞渗透压和PH值的调节比较好,但是我们为了洗净非特异性,一般用PBST
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藤椅
发表于 2015-10-18 17:22 |只看该作者
回复 yeshch 的帖子. b0 o; r# o* E) V8 @8 b
& z/ V. d- p: m5 ?8 l
用PBST效果比PBS要更好吗?背景更干净?之前还没用过PBST。
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板凳
发表于 2015-10-19 09:22 |只看该作者
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是的,由于PBST中的吐温具有较好的洗涤作用,所以能把非特异性的洗得更干净
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报纸
发表于 2015-10-19 15:26 |只看该作者
回复 yeshch 的帖子
' U" s* v& m9 n" `2 `4 z
$ o+ n0 L* A3 ]学习了,下次可以试下效果。

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地板
发表于 2016-1-15 10:12 |只看该作者
用PBST,PBS用的时候加些吐温
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发表于 2016-1-31 10:32 |只看该作者
封闭液是在加一抗前用来洗细胞的,去除特异性结合,用PBST洗一抗。
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发表于 2016-1-31 11:34 |只看该作者

) k3 x5 G6 f4 l3 z4 {8 A7 {: u封闭液是在加一抗前用来封闭膜上的蛋白吗?
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发表于 2016-2-1 10:28 |只看该作者
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' B  l7 t, `) _+ \0 _% @5 y! L2 V3 ?, x& H# G, R
貌似PBST好一些,但是也用过PBS很长时间,感觉差别不大,具体试验方法还是要自己摸索
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发表于 2016-2-2 09:55 |只看该作者
封闭液洗一抗后,结果的背景会少很多
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