新型比例型荧光传感器用于DNA修复酶PARP活性分析

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来源：生物360 / 作者：coo / 2015-10-22
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真核细胞有着复杂的修复系统以确保核酸代谢的正常进行。多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP-1）是动物细胞中与DNA修复和蛋白质翻译后修饰密切相关的一种蛋白酶。PARP-1通过识别结构损伤的DNA片段而被激活，在受体蛋白表面进行翻译后修饰，有助于修复蛋白的结合而进行DNA损伤修复。因此阻断肿瘤细胞中的DNA修复通路是目前肿瘤治疗的一种新的有效途径。通过抑制PARP-1的活性，可以阻碍DNA修复，加速细胞的不稳定，从而达到杀死肿瘤细胞的目的。因此PARP-1活性分析及其抑制剂筛选在癌症分析及抗癌药物研发等领域有重要意义。
4 Y6 m8 S2 e8 H科学家利用阳离子共轭聚合物和超电荷绿色荧光蛋白（scGFP）之间的荧光共振能量转移（FRET）现象，开发了一种简单且无标记的PARP-1活性分析及其抑制剂评估方法。激活后的PARP-1可自修饰具有大量负电荷的聚ADP核糖，其通过静电作用可吸引阳离子共轭聚合物和正电荷scGFP之间相互靠近，从而后二者之间可发生有效的FRET，并通过比例型荧光信号实现了PARP酶活性的灵敏定量检测。与传统方法比较，该方法操作简单，无需修饰，通用性强，灵敏度高，提供了一种筛选PARP-1抑制剂及抗癌药物的新策略，在相关抗癌药物筛选等方面有较好的潜在应用前景。
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0 |2 Q4 r% ~7 Z4 m: F) H0 `. R7 h原文检索：A poly(ADP-ribose) polymerase-1 activity assay based on the FRET between a cationic conjugated polymer and supercharged green fluorescent protein7 N+ ]: \4 n0 H0 t2 }) v