有人有间充质干细胞流式细胞术上机前的实验步骤吗，，，，，，

yingfeixiang

1. 消化收集所需细胞数，离心洗涤弃掉培养基，PBS悬浮细胞。' l( ?! d0 j; E2 @
2. 准备流式上样管，分别加入相应抗体：
0 ~; F9 ~5 R) Y8 o- o; J" [3. 每管加入细胞悬液，与流式抗体混匀，4℃避光孵育30min。
0 a# o/ z) i( i9 A7 {" g0 a0 r# h: J0 `4. 加入PBS缓冲液2ml混匀，1500rpm离心10min洗涤细胞。( }2 K& Z! z! V: V: Y
5. 弃上清，加入1%多聚甲醛悬浮细胞。
3 I+ l2 L# A) A" W6 P6. 200目尼龙网过滤，准备上机检测。

yingfeixiang

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" d& w1 q9 R9 \. `4 r一般的5*10^5细胞就可以做出很好看的流式图，不知道你的方案是怎么设计的。

yingfeixiang

回复 ych123 的帖子) b- O0 y8 ?- \

* L$ {* Y- H) s  H细胞数肯定够做的了

yingfeixiang

回复 ych123 的帖子$ b/ o1 [: g! j5 ^1 C
4 x- r$ w, `/ w9 |! T0 U: z
你做五管，细胞肯定够了，一个是在离心清洗时细胞丢失太多了，第二个就是最后重悬时没有做好，还在流式管底呢，可以振荡器振荡一小下