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关于脐带贴壁的问题   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-12-2 11:23 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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我最近做脐带间充质原代组织培养 1、 不知道为什么没有细胞爬出来   本来怀疑是染菌  但是做了检测却显示没有  。
. B3 t6 j% d( v                                                      2、网上都说组织块剪成1-2mm3,但是贴壁有一半贴不上,这里面有什么细节么  ?关于贴壁
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发表于 2016-2-2 16:15 |只看该作者
回复 忘虚 的帖子# h: L/ Y6 ~5 J5 f0 _
" h6 p$ H" }7 ]. x% T* p; f
1、建议加10ml培养基放一周不动即可;9 j( H  P6 T& y# X0 }6 }5 Z
2、大部分贴不上正常,干细胞占比极小。
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发表于 2016-2-2 12:58 |只看该作者
组织块贴壁法养细胞又不是所有的组织块都会长细胞出来的。其实就是克服一下,不要天天看,天天动。只要不污染,细胞培养皿放置一周后半换液,10天后看看细胞就行,会有惊喜的。一般13天以内,原代就能长到传代的程度。
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发表于 2016-1-21 09:34 |只看该作者
我第二次组织块培养,四五天也长出细胞了,但是不多。
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发表于 2015-12-30 14:57 |只看该作者
回复 zengping120919 的帖子
* o. Q; T1 Q+ ~( C7 C: B% b+ p8 X) M2 E& @* m3 T. x
麻烦问一下,您四天长出细胞时,培养基的颜色有何变化?

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发表于 2015-12-30 13:08 |只看该作者
回复 蜗牛爱贝贝 的帖子
- \" _) L" Q5 d. v& Y6 C3 x- Z
, B2 J6 O# K+ ?  T这是在脐带非常好的情况下,一般情况下要一周的,而且刚爬出来的细胞只有一点点,如果不仔细找的话,可能看不到
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发表于 2015-12-23 11:50 |只看该作者
回复 忘虚 的帖子
; M1 H1 {5 w  N/ ~0 w- @, u. d5 p/ M5 V  d9 z/ D" R2 u
不客气。脐带存在的个体差异很大,也和采集时间的长短有关,当然是采集时间越短越好,个体差异就不用多说了,就跟人一样,有身体好的,有体格弱的,你懂。
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发表于 2015-12-23 11:38 |只看该作者
你说不好贴壁的话 刚开始贴壁的时候你的培养基加了多少毫升?; q" Y5 R4 J9 W% q3 I
我们一般是制备时先加5ml、次日补加5ml、第三日补加7或8ml,这样应该会比较容易贴住。
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发表于 2015-12-21 16:19 |只看该作者
回复 woshibotao_01 的帖子
& w8 G% L: p  Z1 |* a$ }6 F' u, F; @: G0 u( U! a3 j. V: v
谢谢,我采用半干贴  最近长得还可以   反复看了以前的  原因是脐带太差了    脐带一点都不白  很多都是黏糊糊的胶
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发表于 2015-12-17 11:55 |只看该作者
种瓶后 就不要动了 中间过5-7天换下液  一般到两周左右肯定是会长出来的  尽量不要晃动瓶子
7 Y; W9 C  _! G1 y: I: i% A还有就是 个然感觉 组织块剪的不要太小 太小贴壁也不是很好 & V; V, E3 S9 f4 y: r  L* i
还有就是培养基加的也不要太多! @6 z: c2 X3 z7 R6 O
很容易的
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