体外受精培养液的pH各是多少！

huozhicb

给位大虾，小弟摸索了好长时间的IVF但是效果一直不好，换了很多培养系统（HTF/KSOM-AA、mKSOM/KSOM、T6/CZB）都不稳定，找了一些原因，发现各方面的资料里，对于IVF过程中使用的各培养液的pH描述得很少（也许是小弟不才，没有查到一手资料），请各位专家指点。麻烦大家把自己使用过的系统和每一过程使用的培养液的pH晒一下吧，谢谢！. Y( M( @. X4 S4 Y; o
我配好各种培养液之后，将所有培养液都调pH至7.4左右，使用前12h做成小滴，用矿物油覆盖，放入培养箱平衡。

huozhicb

回复 帕帕拉 的帖子, m- I' M# R! y8 }
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小鼠的谢谢支持

huozhicb

回复 jhu132llh 的帖子2 H) O8 ~1 q) i% g  I* S8 q
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谢谢您支持！我们的培养箱是新买的，买的时候校准过：37℃、5%五九高纯二氧化碳、饱和湿度。% G- ?3 W( r+ K
我想问一下，你们的pH时按照《小鼠胚胎操作手册》上的方法，先充气平衡然后测pH吗？
& g6 x/ {4 r3 M9 a  o( i我们这里没有充气的装置，所以直接用pH计调的pH。感觉靠酚红的颜色标定有迷惑性：加了BSA之后培养液的颜色都偏黄。4 T9 K; X2 \# j( ^6 D' F: U

huozhicb

回复 jhu132llh 的帖子3 H) g4 J! x: n8 g$ ~

% r8 d9 v# S/ F0 a: C) w谢谢版主我之前摸索的时候为了以防万一（因为以前实验室做这个一直效果不好），花血本买了进口的HTF和KSOM-AA（有点二，但出于无奈，实验很紧），这两天试了试，结果也不好！
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之前您说培养箱可能有影响，二氧化碳装机后已经请公司的人测过了。我又重新测了一下培养箱的温度，培养箱的最上面一层和最底下一层之间相差0.5℃左右，最高温度（长期放置的温度计的读数）能到37.5摄氏度。这个有影响吗？
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0 K0 _* H$ n1 W0 R我仔细观察过受精时间结束后的情况，有不少精子围绕卵母细胞，但是能受精的却很少，是获能不好吗？我每次都是将精子稀释后，获能1小时，受精5-6小时，需要再延长吗？
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% R2 c/ o: ~# v( _+ A6 W; N8 b# {麻烦版主大哥了，谢谢！

huozhicb

回复 jhu132llh 的帖子. }3 u7 y8 H8 ~" h0 g5 Z

# r- ?+ [; \, R谢谢版主我之前摸索的时候为了以防万一（因为以前实验室做这个一直效果不好），花血本买了进口的HTF和KSOM-AA（有点二，但出于无奈，实验很紧），这两天试了试，结果也不好！
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0 c  K, ~% F: a# p1 g7 w. N+ H# B- d5 d之前您说培养箱可能有影响，二氧化碳装机后已经请公司的人测过了。我又重新测了一下培养箱的温度，培养箱的最上面一层和最底下一层之间相差0.5℃左右，最高温度（长期放置的温度计的读数）能到37.5摄氏度。这个有影响吗？. ]" X# l- ]5 ?$ w+ [- f. E; C

) u+ s) F3 \! Y4 J8 Y我仔细观察过受精时间结束后的情况，有不少精子围绕卵母细胞，但是能受精的却很少，是获能不好吗？我每次都是将精子稀释后，获能1小时，受精5-6小时，需要再延长吗？
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4 ?3 K7 E& d6 Z" i3 p0 m" \麻烦版主大哥了，谢谢！