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楼主: 皮搋子
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绵羊脐带间充质干细胞,无文献摸索-Ⅱ 细胞诱导分化鉴定 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-2-18 22:41 |显示全部帖子
说实话,做过诱导,但是也不精通,更没做过绵羊的,
+ K/ p3 X- A* S& \第一个问题,那个融合好了的才去诱导分化,我做的都是80%时候去诱导的,没有那么满,脂肪的诱导比较快的,两天就看出来油滴出现,细胞少了好多,大戒指的样子很明显,第四天我去染色了,结果还不错。成骨的诱导有点慢了,但细胞也是在生长的呢?我还传了两次代呢期间。
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沙发
发表于 2011-2-18 23:00 |显示全部帖子
油红O 是红色粉末,很好买的。染色很方便的,神器用不到,但是你得用圣器盛着,' v. y7 J7 c6 X; J" e
我们是用0.5g 溶于100ml异丙醇中室温放置备用,用的时候直接吸取6ml加入4ml的蒸馏水混合好了之后过滤一下用于染色,7 m' N, z# B; k, L: [" u2 z
细胞先用10%的甲醛固定然后在染色,染色15min后冲洗干净观察就好了。* B1 h* k$ E+ T& Q8 m7 \
- P" ~7 F( `0 e; Z; A3 v
对于成骨的诱导染色,一种染色方法就行,我们用的是α萘酚磷酸钠 35mg+坚牢蓝RR 35mg 溶于35ml0.05M丙二醇,这个染色液去染色30min之后冲洗观察,也是先10%的甲醛固定。2 s" w9 f; B4 |+ Q! J/ x* _
# c$ U3 O8 k- G
不用其他的设备了吧,有个显微镜够了$ d- d: i1 \0 @) r2 p+ ~
, \3 U' o# I0 k* s- x
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藤椅
发表于 2011-2-18 23:05 |显示全部帖子
诱导剂加的东西都一样,就是地敏的浓度有差异,不知道
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板凳
发表于 2011-2-20 22:02 |显示全部帖子
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金戈 发表于 2011-2-19 15:31
) x: R6 \! p. f# l" z回复 皮搋子 的帖子' z7 [. R/ F4 m4 g0 r5 n- S- R

8 b9 _; X2 c5 f- c- B3 d( RTO 1: 染液不需要无菌。
6 [) w$ \7 _( `* z  _% y
都帮我说了,谢谢,:)
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