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小弟刚开始bMSC分离不久,有一些问题不是很懂:
( o8 n! A& o0 v$ D+ D, |1、传统的成骨细胞分离方式一般是通过骨碎片爬细胞方法,主要方法参考一些文章(,为了方便就列出中文的“小鼠颅骨成骨样细胞体外分离方法的改进”),大致过程是取颅骨细胞,剪碎成1mm3碎片,直接接种或者酶消化后接种,然后让细胞爬出,获得“成骨细胞”。
$ d( P+ _# `5 H$ e但是看了一些骨髓来源间充质干细胞(bMSC)的分离新方法,主要有军事医学科学院毛宁实验室做的,发表于“Nature Protocols 5, 550–560 (1 March 2010)”,完成人是博士生朱恒,他博士论文中说的将股骨和胫骨的骨片剪碎,胶原酶消化后接种,让细胞爬出。
) j- `: E2 u# v; B这两种方式很像,为何一个分出来的是成骨,一个是MSC?" |/ q( ~$ a$ Q8 \
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2、另外就是bMSC分离和纯化的方法,实验室移植采用骨髓法获取bMSC,主要是用培养基冲骨髓,然后接种,通过差速贴壁法获得bMSC。但是我看很多同仁,觉得这样MSC还是有很多杂细胞,想知道大家在这个过程中用的方法怎样的?有没有关键的步骤? |
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