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优秀会员金话筒

楼主

发表于 2011-7-25 16:31 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印

最近一个师妹的rt-PCR总有杂带不是实时定量PCR，欢迎分子生物学方面的同学参与讨论。是PCR试剂有污染，还是引物不好，引物是从一些文献中引用的不是自己设计的。还是PCR的程序选的不够好，还是因为反应循环太多，她用35-45个循环。提RNA使用的都是RNA酶free的枪头，PCR使用的是一般灭菌的枪头。

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沙发

发表于 2011-7-26 14:26 |显示全部帖子

回复 zgzjhzxyj 的帖子! E7 A' B6 d4 | p- g; t; m( O
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谢谢！我师妹用的有GAPDH和actin 内参也有杂带。关于引物设计有相关的书推荐一下吗？多谢了。

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藤椅

发表于 2011-7-26 14:28 |显示全部帖子

谢谢大家的回复，我们会一一总结希望能找到原因！

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板凳

发表于 2011-8-2 16:56 |显示全部帖子

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非常感谢！

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