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角膜缘细胞 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-7-29 12:53 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
角膜缘细胞在传代过程中,总是有大量细胞死亡,该怎么办?向各位大侠请教!
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沙发
发表于 2011-8-1 13:31 |显示全部帖子
非常感谢!我的细胞是原代培养的细胞,于35皿中培养,细胞密度很大,连续培养了有两周的时间!出现了细胞复层的现象,个人觉得,细胞在同一皿里连续培养,不传代,是造成这一现象的一个原因。但是无论如何,传代的时候,该有细胞贴壁才对,但是我发现没有。又做了一批,感觉还不到传代的密度,不知道胰酶的影响是否很大,可否换成1型胶原酶?或者其它的什么酶?我刚刚开始接触角膜缘细胞,对它的脾气还不是很了解,我一般是每隔两天换一次培养液!我么培养液有专人配置,属于保密配方。传代培养,它们原来做过,效果也不好,不知到和这个培养液的关系大不大,不知道大侠用的什么培养液,我只知道现在的培养液血清含量比较低,但是可以去除原代培养中可能出现的成纤维细胞。
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藤椅
发表于 2011-8-1 15:06 |显示全部帖子
我做的是人角膜缘原代细胞培养,传代,传不下去,目前培养一个35皿,长满,复层,组织块法,需要两周左右,不超过两周。我上次细胞传代,感觉胰酶消化时间不长,显微镜下观察变形,即终止!领导说做过鉴定!
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