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肿瘤干细胞的提取方法 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-1-13 17:36 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
看文献说, 如果marker已知,MACS及FACS有很大的优越性,分选的细胞纯度较高,而且高效快捷。但在marker未知的情况下,则可先以有限稀释法做初选,得到单细胞克隆,再进行免疫磁珠分选即可得到较多的CSC。肿瘤干细胞有可能会分化,那么单克隆实验条件下,会出现具有不同marker的细胞,包括肿瘤干细胞、过渡细胞和其它各类肿瘤细胞。因此,有限稀释法在得到单细胞克隆的同时,还可同时鉴定肿瘤干细胞的分化能力。  L4 F- h! p7 v
但是悬浮球培养法不是分选和鉴定一步到位吗?即肿瘤细胞在添加了生长因子的无血清培养基中生长,其中的CSC增殖而形成致密球状,保持不分化状态;而非CSC则贴壁生长,且在无血清条件下生长速度缓慢。将此悬浮球在加入表皮生长因子、碱性成纤维生长因子等的培养基中培养,可促进肿瘤细胞增殖,并传代多次;置于含血清培养基中,则可发生多向分化;接种于裸鼠,可体内成瘤。+ J$ R7 k6 n  k4 j0 z& K
老板让我做子宫内膜癌干细胞提取,到底用哪种方法比较好啊?还有悬浮球培养法中悬浮球怎么分离啊?望坛里的高手指点,谢谢。
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沙发
发表于 2012-1-14 15:18 |显示全部帖子
回复 zhanglianglu 的帖子; R+ e9 s2 d( B% |& \, I! Q

# ?( n- h0 E. E+ C接种裸鼠是验证肿瘤干细胞的一种方法,即裸鼠成瘤,你提取的假定CSC是否有干性还得验证,而裸鼠成瘤是最权威的方法,我提取csc是想做耐药方面的后续实验。
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