神经干细胞固定问题！在线等答案！

Tim

我今天上午做了个神经干细胞固定！固定完后细胞像被胰酶消化一样！感觉很差！不能用来鉴定了！大家帮忙看看我的问题出在哪里？（1） 吸取培养液。
& q% e/ j1 l) b) E! U) ]8 E1 S& Q! y+ z        （2）用PBS洗了一次！时间1MIN0 ?# a4 ?" V+ x
          (3)  加4%的多聚甲醛0.5ML，超净里放置20min，吸掉多聚甲醛
" d. ~/ ], i- D7 t         （4）用PBS洗3次！每次1min，
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+ i3 f- ^0 @9 R* {多聚甲醛不是我自己配的。我这里有俩种多聚甲醛（1）4%多聚甲醛   0.01M      (2)4%多聚甲醛   0.1M   
4 P: a0 c" L, w, u$ t$ e我上午用的是(1)多聚甲醛          这俩甲醛有什么不同吗？？0.01M    0.1M指的是啥？？
. D9 ~1 L" k  h) M4 X
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Tim

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9 j: S: e) n" ^3 G1 @3 e/ w: a6 W1 J! b; K% i
之前一直是在负20放着！37度水浴锅融化！！多聚甲醛没见任何异常！细胞固定前状态还可以！本人认为可能是时间20min有点长？？？老师你认为呢？5 N  y/ e* G0 g

Tim

回复 ljs 的帖子) H' Q, R, a+ U8 m
" m% r9 I4 Y4 p$ u7 `+ B1 O
回答（1）固定完后境下可见细胞回缩！像酶消化过后！: s7 b/ ~; ?! a$ w, S2 [! x
       （2）固定完后细胞回缩很厉害！成片的向上飘！贴壁的没多少了！
1 G- k/ G: W# r% B4 d7 F3 n, Q       （3）实验条件就有多聚甲醛，还有共聚焦。还不是我配的！4度固定这个真不知道。至于时间我们老师说20MIN就好，具体我也看了看文献！
+ F9 r/ X" e" y: y1 S% {$ y- _          ( e! f3 l3 G0 d( [5 F* ]; R6 a

3 G8 N" X' N& H! ?) ], }0 _# L福尔马林固定方法能具体讲讲吗?还有在4度固定的原理？

Tim

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3 l# |: U4 ]- [2 v1 d6 d. A; c2 r/ I
/ x: a" V* u1 \# H$ ?. T: D现在实验室只有以前配的！但是我同事前几个月还固定过没啥变化！

Tim

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. Z5 Q; H& E, }( `7 v. G* {8 L" }* t& y2 y2 j& l% R
我现在想想应该是多聚甲醛的PH值有问题！

Tim

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1 j3 A$ }; G9 y' ?' I, V% ~- j9 a对细胞的影响咋样！回缩了吗！？、