用培养瓶培养CIK细胞的有关装液量的事儿

锋12

corning的T175的培养瓶，瓶子显示最大装液量为250ml，用其来培养cik细胞，当细胞悬液达到一定体积后就要及时转瓶。请教一下各位一般装液量达到多少体积才需要转瓶，通常该瓶子保持多少体积对于CIK细胞快速增殖最合适，前期少装些后期多装些？谢谢！

锋12

密度方面我这边大概保持在1*10的6次方左右，前期大约装量50ml就开始转瓶，后期保持装量在100~150ml左右

锋12

各位关于培养瓶中cik细胞悬液的密度如何计算，取出部分悬液后用（手工的计数板、自动的计数仪)检测其密度？有啥好办法不妨介绍一下，感谢。; X& `" r' d& }( l8 m- j
一、另外，细胞长势好会出现很多集落和单个细胞的，仅仅是将瓶子晃动一下就取样检测我觉得不能准确反映出其真实的密度。5 ]; N: Z' G, z8 F  [
二、用移液枪吹散后再取虽说好些（据说过度吹散对细胞生长是有影响的），但体积较大的时候也不能完全吹散的。7 x6 X$ d# N" h& `
三、离心收集细胞用合适体积的培养基重悬后并吹散再取（不少人提到离心对细胞来说会出现损伤甚至损失的后果）。