用培养瓶培养CIK细胞的有关装液量的事儿

锋12

corning的T175的培养瓶，瓶子显示最大装液量为250ml，用其来培养cik细胞，当细胞悬液达到一定体积后就要及时转瓶。请教一下各位一般装液量达到多少体积才需要转瓶，通常该瓶子保持多少体积对于CIK细胞快速增殖最合适，前期少装些后期多装些？谢谢！

小猫狸狸

对于细胞增殖来讲，需维持合适的细胞增殖密度（我们是5*10的5次方到1*10的6次方左右），根据细胞密度调整装液量；一般总体积200ml就可以转瓶了

saberche

其实并不是悬液达到一定体积后就要及时转瓶，需不需要转瓶或者入袋要看你的细胞密度，比如说装了250ml，细胞密度是2.0*10^6/ml，而你所需的细胞密度是1.0*10^6/ml，那你就需要再扩一个瓶。一般情况下7天之后细胞扩增速度会很快，这时就可以入袋了，当然也可以继续按照细胞密度扩瓶。细胞增殖速度跟细胞密度关系密切，密度大了小了都不利于细胞增殖，所以在培养过程中一定要控制好细胞密度。

锋12

密度方面我这边大概保持在1*10的6次方左右，前期大约装量50ml就开始转瓶，后期保持装量在100~150ml左右

saberche

回复 锋12 的帖子6 @# b/ k! R9 Y; @8 v" y
7 t* T# F+ q6 X& k. X) z+ S
在细胞密度符合的前提下装液量提高到200ml是没问题的，我们一般是接种时细胞密度高一些，细胞长起来后，在调低

木头1102

我们60ml左右的外周血分离的单核细胞，50ml培养液重悬接入T175瓶子，后面视细胞量补液50ml至总量100ml，再次补液100ml至总量200ml，之后分瓶。细胞长起来后转袋。

king8

根据扩增情况吧，我们一般前期是50-100ml，后期增至150-200ml，少数可以达到250ml。
# E" W1 x6 m( Y+ b% `& G主要是根据细胞密度扩瓶，因为细胞增殖速度跟细胞密度关系密切，密度过高或者过低都不利于细胞的增殖，所以在培养过程中一定要控制好细胞密度。

飞翔的烨

细胞增殖的速度固然与种植密度有关，但个人认为，和是否加血清或血浆正相关，那长的速度不是一个数量级的。

小刘

我们用的75的，每瓶装到60ml，及时传代，5天就是两个60转袋到1.8L培养袋中使其增殖

小馬

这个不是看体积，应该是看密度。我们用75的，，后期转袋