求救哇，G418筛选ES

always_wp

呃，在向ES中转染个目的基因，随后进行移植，可是现在要用G418进行压力筛选，高手们给我点建议吧，谢谢啊
, |: x5 |2 _* A, k( [) |% G

zpzp0312

回复 llecstem 的帖子" b" g) i2 \) L! T2 y
7 \4 a- E0 S, }  C
抱歉啊
* ~+ G8 Z5 z8 E& @# p) |% A  P. J具体剂量我现在不清楚
" u7 y8 n' F4 ^# x还是查查文献摸索一下吧

llecstem

回复 zpzp0312 的帖子
( z6 \: h$ p5 L3 i
+ M; m& l* c) C& K! h谢谢！用它作负筛，是不是也要想G418一样，摸索一个最适合的浓度？你们用的一般是多少？再次感谢！

zpzp0312

回复 llecstem 的帖子
% A' N2 ?4 i# i& w0 A7 F: L, T: E( R( M; [# q
tk基因的负筛选是更昔洛韦

zpzp0312

更昔洛韦

llecstem

回复 zpzp0312 的帖子
4 t4 i9 K5 d9 V% |6 n; t2 B7 z) L8 t/ R
你好！我想请教个问题，负筛用什么试剂？谢谢！$ e" b0 ]6 i; Z9 D( C2 j

zpzp0312

一般文献说电转24小时后做筛选，G418浓度300ug
6 _- A' H1 ?/ |4 C# _) m9 s一周到十天就可以得到抗性克隆" n. l4 n& n/ G1 A
另外，不知楼主使用的饲养层是不是也是G418抗性的MEFs啊？