求救哇，G418筛选ES

always_wp

呃，在向ES中转染个目的基因，随后进行移植，可是现在要用G418进行压力筛选，高手们给我点建议吧，谢谢啊
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zpzp0312

一般文献说电转24小时后做筛选，G418浓度300ug
0 y7 y1 @# {" S. d5 U$ [  M一周到十天就可以得到抗性克隆. _# N+ q3 l0 w; g. F7 N
另外，不知楼主使用的饲养层是不是也是G418抗性的MEFs啊？

llecstem

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/ J  }4 N1 B6 E+ t, m! i/ H& h! p- R9 ^
你好！我想请教个问题，负筛用什么试剂？谢谢！9 c) \5 U( K6 v9 H* W6 j( O- ]

zpzp0312

更昔洛韦

zpzp0312

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' |! U$ |, c$ Z/ X2 J- _8 m/ R8 M
. T0 j' a8 m2 S3 c2 R0 itk基因的负筛选是更昔洛韦

llecstem

回复 zpzp0312 的帖子. Q% x  ?. @! `" z3 x
4 n% A* a8 s+ F  |/ L+ t, a
谢谢！用它作负筛，是不是也要想G418一样，摸索一个最适合的浓度？你们用的一般是多少？再次感谢！

zpzp0312

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  z* [/ S# \0 T3 I0 U7 s8 E
5 @2 ]" W% Q$ P( z  K) }抱歉啊5 _! r* S2 E( H: E$ W
具体剂量我现在不清楚
0 k% o1 M6 N( e4 g还是查查文献摸索一下吧