胰酶消化问题

1195963542

胰酶消化时间过长，对以后细胞培养有什么影响？细胞会死么

yooung

胰酶分解细胞表面膜蛋白，消化时间过长，估计严重点会消死细胞，也可能导致以后细胞培养时细胞贴壁不紧。

baby00000003

试试看trypLE吧，据说是细胞在那里面泡上个半天都不会死

1195963542

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终止原理是什么呢？      可以直接用培养基终止消化？

baby00000003

回复 1195963542 的帖子' M0 I7 I1 Z8 \- ]. ^, a- Z5 C) A

8 z" p+ d* L$ X( X8 U无需终止，离心洗干净就ok了.....

1195963542

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5 [! U7 X8 J2 C0 p* e$ y1 `9 B8 |! X! h
哦  亲  你们用过么  听着这么好呢 呵呵

baby00000003

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8 X% X1 _* ~& ^9 \2 I( n2 X) v+ \- x" m6 }6 y; R
一直在用呀，不过没有故意的把细胞泡那么久过

1195963542

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2 P* L! ^8 x0 s, e6 v0 s8 Y: t$ ~$ u" R" a9 C; C
你们培养的是什么间充质干细胞呢，浓度是0.125%的么    时间控制在多长时间呢

tingting2113

回复 1195963542 的帖子; {8 c' D- J& S/ x% t  K
+ e4 x/ |- P# [7 S6 D
影响细胞活性和贴壁状态，严重的情况细胞会死亡的。我们消化都是需要终止的，直接用培养基终止消化进程。

小猪32

回复 1195963542 的帖子0 _: ]- L# E/ R( l- c; f; R' t

# r) u1 o* F3 r7 k胰酶消化时间过长会影响细胞贴壁，所以建议消化前将胰酶复温，加入胰酶后，镜检，若细胞皱缩，细胞间出现间隙，即可轻拍培养瓶，细胞会成流沙状滑落，加入完培，吹打即可