胰酶消化问题

1195963542

胰酶消化时间过长，对以后细胞培养有什么影响？细胞会死么

yooung

胰酶分解细胞表面膜蛋白，消化时间过长，估计严重点会消死细胞，也可能导致以后细胞培养时细胞贴壁不紧。

baby00000003

试试看trypLE吧，据说是细胞在那里面泡上个半天都不会死

1195963542

回复 baby00000003 的帖子
% E0 C- S( V4 Y3 T- Q
5 v' r2 P7 A# L6 W( B! p终止原理是什么呢？      可以直接用培养基终止消化？

baby00000003

回复 1195963542 的帖子9 n  x! _' ^* t. V5 M9 Y* n

! n% O6 p% K* c1 u无需终止，离心洗干净就ok了.....

1195963542

回复 baby00000003 的帖子
" W1 S# j9 Z. D# z" M/ C2 R$ T2 l+ H
哦  亲  你们用过么  听着这么好呢 呵呵

baby00000003

回复 1195963542 的帖子
  r8 ^- ?! B) M& ~, G
$ q. d. {. Y" d: z- P& y8 `3 Y. c一直在用呀，不过没有故意的把细胞泡那么久过

1195963542

回复 baby00000003 的帖子
9 \) E. l; y6 }; w* u8 U9 `3 d( [; e1 A& N  T  T! v
你们培养的是什么间充质干细胞呢，浓度是0.125%的么    时间控制在多长时间呢

tingting2113

回复 1195963542 的帖子# i# z1 v5 c/ ~0 g- K6 k
$ K. X- Y7 k; p
影响细胞活性和贴壁状态，严重的情况细胞会死亡的。我们消化都是需要终止的，直接用培养基终止消化进程。

小猪32

回复 1195963542 的帖子+ q; |/ h/ e/ q  M6 D" B# C& E; U

+ C1 Y! `- i3 _1 x胰酶消化时间过长会影响细胞贴壁，所以建议消化前将胰酶复温，加入胰酶后，镜检，若细胞皱缩，细胞间出现间隙，即可轻拍培养瓶，细胞会成流沙状滑落，加入完培，吹打即可