胰酶消化问题

1195963542

胰酶消化时间过长，对以后细胞培养有什么影响？细胞会死么

yooung

胰酶分解细胞表面膜蛋白，消化时间过长，估计严重点会消死细胞，也可能导致以后细胞培养时细胞贴壁不紧。

baby00000003

试试看trypLE吧，据说是细胞在那里面泡上个半天都不会死

1195963542

回复 baby00000003 的帖子5 c( R3 W( i$ u* ?. z6 H

% J$ i' [4 {& G* f# ]( `" I终止原理是什么呢？      可以直接用培养基终止消化？

baby00000003

回复 1195963542 的帖子. [9 k. X" R- o' p
1 @! u/ S& P6 G  O* {2 u2 z( C. t
无需终止，离心洗干净就ok了.....

1195963542

回复 baby00000003 的帖子4 h8 B7 y8 E- ]) j% h+ `: B
, P4 Y) S6 j6 o0 c
哦  亲  你们用过么  听着这么好呢 呵呵

baby00000003

回复 1195963542 的帖子) n$ J+ h4 G! |& t; b7 s) N8 `7 W

# T+ x3 E- a6 d9 E一直在用呀，不过没有故意的把细胞泡那么久过

1195963542

回复 baby00000003 的帖子, `" k( \' w) }3 d
1 I1 _# {8 g+ B
你们培养的是什么间充质干细胞呢，浓度是0.125%的么    时间控制在多长时间呢

tingting2113

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( b9 C2 K; x3 L! B
0 _4 u! Y9 {. W& w. O; o3 m% W影响细胞活性和贴壁状态，严重的情况细胞会死亡的。我们消化都是需要终止的，直接用培养基终止消化进程。

小猪32

回复 1195963542 的帖子2 B5 l' H$ Y1 e9 y. c) k6 d

) x: ]- y! R: B; _# p0 [9 q' ~胰酶消化时间过长会影响细胞贴壁，所以建议消化前将胰酶复温，加入胰酶后，镜检，若细胞皱缩，细胞间出现间隙，即可轻拍培养瓶，细胞会成流沙状滑落，加入完培，吹打即可