求助！为何我的BMSC用αMEM养不好？

whyme705

养原代BMSC一开始用的是αMEM培养基，试了很多次，每次都养不过P1，老化得很严重。一开始怀疑是消化过度或接种密度的问题，但后来换了**的培养基之后，用的同样的操作方法步骤，养出来的细胞可以传好几代还能保持很好的形态。但受限于课题需要，估计之后是用不了**的培养基了。想请教下大家，这是什么原因啊？我是不是该加点生长因子，bFGF？
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$ A4 J, C9 H+ e' U7 {4 I+ f上两张图；图一是αMEM养的P1老化的养子7 Y% f7 L: y; z* J  L

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# n' B( Y/ w8 j% _! G: M  _图二是**培养基养的P2
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柠檬冰

我们实验室用过DMEM高糖，DMEM低糖，和F12培养基，貌似都还可以。。。不过最近梅雨季节，细胞快死完了。。。

whyme705

回复 柠檬冰 的帖子$ L1 h! [- i' ]0 T$ @& D

6 o* h$ B9 e" ]6 z# I加了细胞因子吗？用的是啥血清？ 这个。。为何会和梅雨季节有关。。？

孤独山石

F12培养基+10%FBS不加因子。不过我想知道和梅雨季节有什么关系，培养箱的温度湿度二氧化碳浓度都是恒定的。

wzs1985

回复 whyme705 的帖子8 d* O8 _2 m* d" r
0 W" v' h* |2 V( A. P6 d
个人认为，培养基都不是关键，关键的是你的血清。你得好好留意下血清是不是正品还是水货。国内血清市场太混乱了。

zhouyonhzhan

用的什么血清？
0 @5 }7 K7 v4 G( J# ]0 c) J) @

五口二木

我也有体会，在梅雨季节取原代不容易成功，虽说原代是在恒温培养箱里培养的，但它们与季节之间好像有一些相关性，原因不明。

whyme705

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GIBCO，胎牛血清，南美的

whyme705

whyme705 发表于 2017-3-12 18:25
8 x: Z; K: j1 g( j5 R' O$ j养原代BMSC一开始用的是αMEM培养基，试了很多次，每次都养不过P1，老化得很严重。一开始怀疑是消化过度或接 ...

2 ^* {  j; U# A5 \后续：
# B# {6 F& a6 t" v6 ~后来往αMEM中加了10ng/ml的bFGF之后，细胞可以维持很好的形态了。有时间再上图。

shangshiwang

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) H& q3 f" _% X+ A$ z
2 {( ]& V( b7 `2 I2 g2 O$ k请问用的哪家公司的bFGF？