求助！为何我的BMSC用αMEM养不好？

whyme705

养原代BMSC一开始用的是αMEM培养基，试了很多次，每次都养不过P1，老化得很严重。一开始怀疑是消化过度或接种密度的问题，但后来换了**的培养基之后，用的同样的操作方法步骤，养出来的细胞可以传好几代还能保持很好的形态。但受限于课题需要，估计之后是用不了**的培养基了。想请教下大家，这是什么原因啊？我是不是该加点生长因子，bFGF？
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' x! @2 K2 R: t; Q* ]上两张图；图一是αMEM养的P1老化的养子# R8 i$ w2 }/ j! g. I! C; C, Z

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图二是**培养基养的P24 t: w, Z" u9 q: q: R, H1 v% Z1 u+ [

柠檬冰

我们实验室用过DMEM高糖，DMEM低糖，和F12培养基，貌似都还可以。。。不过最近梅雨季节，细胞快死完了。。。

whyme705

回复 柠檬冰 的帖子5 o) V6 m  A  z2 p" P) X; ]

  K$ C2 Z8 \% A) b加了细胞因子吗？用的是啥血清？ 这个。。为何会和梅雨季节有关。。？

孤独山石

F12培养基+10%FBS不加因子。不过我想知道和梅雨季节有什么关系，培养箱的温度湿度二氧化碳浓度都是恒定的。

wzs1985

回复 whyme705 的帖子2 U( P  c/ s) Y
5 W% A# F( o9 {( s) k& b% r# g0 A* g3 q+ S
个人认为，培养基都不是关键，关键的是你的血清。你得好好留意下血清是不是正品还是水货。国内血清市场太混乱了。

zhouyonhzhan

用的什么血清？
. @) [  y" C% b

五口二木

我也有体会，在梅雨季节取原代不容易成功，虽说原代是在恒温培养箱里培养的，但它们与季节之间好像有一些相关性，原因不明。

whyme705

回复 zhouyonhzhan 的帖子( r. d9 Q6 `! ?- M, v$ b3 |3 j9 H

4 D: }0 ?! S# ]- {6 p; C0 qGIBCO，胎牛血清，南美的

whyme705

whyme705 发表于 2017-3-12 18:25 # g# W7 ^7 }6 B% S8 d' w4 v7 I
养原代BMSC一开始用的是αMEM培养基，试了很多次，每次都养不过P1，老化得很严重。一开始怀疑是消化过度或接 ...

1 C( l+ S6 J( n% A. v
后续：
9 L' ?9 h) Q3 X6 ]3 L: X4 o  f9 v) }后来往αMEM中加了10ng/ml的bFGF之后，细胞可以维持很好的形态了。有时间再上图。

shangshiwang

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7 i6 j% W- Q1 k/ v+ B6 Q请问用的哪家公司的bFGF？