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本帖最后由 皮搋子 于 2011-2-17 23:52 编辑
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小弟开始做绵羊的脐带间充质干细胞了!3 U0 q! B5 ?3 X4 h9 I
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话说这绵羊的脐带和人的还真是不一样啊,人的脐带是一个手指头粗的管子,而绵羊是那种透明的黏黏的软胶包裹着4个管子。刚开始的时候没经验,第一根我就按照人脐带的处理办法把上面的粘液弄的干干净净,然后消化了之后我悲催的发现,啥都木有。。。0 E B! b* l+ T7 `( I% y
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第二回老实了,把那个黏黏的东西留着,据同事估计,这玩意就是华通胶(Wharton’s jelly),一次做了2根脐带。
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3 e+ G0 e' a1 I2 x, P3 _有一根脐带特别争气,别的细胞还在稀稀拉拉的长的时候,它5天就长满了一瓶子,175cm的大瓶子啊!!!!真给力!!!形态还特别好!!!
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它还长成了2层,没说的,直接1传10;
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6 M* I! z' r5 r: q( U9 U消化的时候问题来了,上面那层胰酶3分钟就消化下来了,可是下面那层却是纹丝不动。两层细胞长的一模一样,我犯难了。
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不管了,先把上面的细胞给分瓶了再说。! s( O' w7 H: `, ]
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回头再看瓶底的细胞,胰酶浓度0.25%直接上原液。10分钟后,终于下来了,现在我彻底傻眼了,到底上面的是绵羊的Msc还是下面的是????
2 |, c9 z. D1 C4 Q6 g* `) R Y, V) `; S# A b1 \- b! [' V: N7 {% P
我把下面这层也放起来培养着。。。
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1 V" D1 `* Z5 [9 K @0 b" @目前寻找鉴定方法,因为我们没有流式细胞仪。不要劝我查文献,做绵羊脐带干细胞的小弟是第一人。' ~$ U; h" Q+ U& w- [
0 ?0 C* Z4 ]' v0 E3 {/ p就算是做表型鉴定,请问绵羊的脐带间充质干细胞哪些表达,哪些不表达?
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6 H I' l+ Y, f3 r4 a好吧,上图吧。图片有点多,请耐心等待。
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背景亮的是传代后的。& l7 L! r/ ^% m0 z2 |% c& q# o+ B4 F
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