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做了多次HepG2的细胞复苏,刚开始两次都没有问题,复苏成功。 Z }* ?4 Z& U8 N7 @. a
最近好几次全都失败,细胞总是不贴壁,第二天99%都浮起来了。' F5 g$ K$ H# D' X% m! L
百思不得其解,密度(10000/cm2据说最合适),培养液,温度等等都试过还是不行。5 u8 T7 F8 i6 J5 s7 W5 U
昨天教一个同事一起看时,终于发现了一个最愚蠢的错误。, I. D' }9 J4 _2 p( \
我用的是 corning ultra-low attachment surface!
8 c6 B* a3 ^' Z( @; r6 L( ? L
; z1 F) E% f& c1 U' K+ G2 }ultra-low啊 同志们哪!ultra-low!- g) J' e! \; b5 v5 C7 @
; j* U' B7 R$ h转行过来就是有些常识性的问题不知道,痛苦ing!
6 ]: O/ `# d% v ^. o
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' u* S {: r2 X. o7 t: y& J3 Z然后我们把仅存的细胞消化下来 铺到12孔版上,今天他们贴壁了。9 f; k" ?2 D* g9 n% d
接下来我想检测一下这些还能不能用,不知道如何检测hepG2进行性退化,哎。 |
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