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做了多次HepG2的细胞复苏,刚开始两次都没有问题,复苏成功。
8 R4 @, ]2 [' W. C# \6 a% B+ G" \最近好几次全都失败,细胞总是不贴壁,第二天99%都浮起来了。
2 d0 u! [2 n9 f' I( _4 t+ W& p百思不得其解,密度(10000/cm2据说最合适),培养液,温度等等都试过还是不行。: g% b0 d$ r# d- B: U
昨天教一个同事一起看时,终于发现了一个最愚蠢的错误。
( k, u/ T: Z' G( t9 Z% v! \" @; r我用的是 corning ultra-low attachment surface!
' N B" H) i/ r2 r9 I1 e, m
- @3 S9 j" K$ w- V9 multra-low啊 同志们哪!ultra-low!
. C! _, _' P0 x/ r. F5 c, Q( B8 P- v& m
转行过来就是有些常识性的问题不知道,痛苦ing!+ n% c* b P: ?
( R( i4 W1 u8 b: D6 |. v$ Y
- a* `! L; n! a. k然后我们把仅存的细胞消化下来 铺到12孔版上,今天他们贴壁了。
9 y. k3 V( ~- p- d+ K. k% O接下来我想检测一下这些还能不能用,不知道如何检测hepG2进行性退化,哎。 |
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