求详细的冷冻切片sample处理protocol

ivantanqi

最近本人要收tissue （tendon and muscle) sample，1 J9 t  N$ q. I+ f
打算做一些冰冻切片和石蜡切片，后者比较熟悉，
! [/ a: D6 N7 w4 q, v$ a前者没有做过，有谁有比较详细的protocol, 特别是关于怎么处理sample, 怎样固定啊，怎样冷冻啊，
$ Q& w) Y2 f: ?" _) Y能够最大限度的保护抗原啊! t- h3 b( ]0 {  z4 L
有经验的，帮帮忙哦，多谢啦。

ivantanqi

最关键的问题是大家在冰冻进OCT前，固定吗？

dulaiyouyu

冰冻切片：4%PFA灌流、后固定24小时，10%、20%、30%蔗糖梯度脱水，OCT包埋，切片。

gqs2872022

组织取材及时放液氮冻存就行了，剩下的交冰冻切片的技术员处理。

aminhair

到中国病理网吧，那里有专业的人。

addlepate

找到冷冻切片机，问用过的人，这个还真没必要做书面功课，
7 \+ E" |( S4 l1 ?) O前面的固定和脱水就按楼上某位的指导就行了，后面包埋基本是在切片时处理（注意载玻片一般也是需要包埋过的）。

shen_coco

回复 dulaiyouyu 的帖子' h1 N/ S3 v% x$ f
( V" C( w  E- Y6 [6 S5 T
需要固定吗？直接包埋行不行啊

dulaiyouyu

回复 shen_coco 的帖子0 s: v6 \# l% b6 G2 j

. E1 g/ _, }( Q4 p当然要固定。

shen_coco

dulaiyouyu 发表于 2011-7-23 13:50 . l# {. f2 m8 N* t. [# C5 i
回复 shen_coco 的帖子7 Z+ n. C# @+ N0 b$ d# m! P

$ k# y2 d: J$ Q% h0 A当然要固定。

* Y) V9 z6 q* L1 n
我听别人说，直接用TISSUE-TEK OCT 在-80度包埋就行，不知道这样做可以么，固定的作用主要是什么啊

runsong

是先切片后固定还是先固定后切片？