求详细的冷冻切片sample处理protocol

ivantanqi

最近本人要收tissue （tendon and muscle) sample，+ i, h9 @+ r1 g4 t6 @
打算做一些冰冻切片和石蜡切片，后者比较熟悉，! t* g# d, Y* w* p  A
前者没有做过，有谁有比较详细的protocol, 特别是关于怎么处理sample, 怎样固定啊，怎样冷冻啊，4 V' e5 C7 `- D% H0 S
能够最大限度的保护抗原啊
! r0 ~$ d7 m- P: _有经验的，帮帮忙哦，多谢啦。

ivantanqi

最关键的问题是大家在冰冻进OCT前，固定吗？

dulaiyouyu

冰冻切片：4%PFA灌流、后固定24小时，10%、20%、30%蔗糖梯度脱水，OCT包埋，切片。

gqs2872022

组织取材及时放液氮冻存就行了，剩下的交冰冻切片的技术员处理。

aminhair

到中国病理网吧，那里有专业的人。

addlepate

找到冷冻切片机，问用过的人，这个还真没必要做书面功课，
# ~  e( v0 ^+ A2 K前面的固定和脱水就按楼上某位的指导就行了，后面包埋基本是在切片时处理（注意载玻片一般也是需要包埋过的）。

shen_coco

回复 dulaiyouyu 的帖子; S2 o. C6 v  J# v# A; b/ \4 q
1 H, }6 C2 m# f9 z9 K* B7 ?
需要固定吗？直接包埋行不行啊

dulaiyouyu

回复 shen_coco 的帖子! ?: K/ a$ \7 q# Y) \# x: w" T

  h* J! m1 N8 u5 V6 {* A当然要固定。

shen_coco

dulaiyouyu 发表于 2011-7-23 13:50
, O9 P. a5 J, B$ G回复 shen_coco 的帖子) @2 M9 a4 e) |

) e/ P, Z# {8 p4 B$ i当然要固定。

$ Y0 {7 z1 L, }- T
我听别人说，直接用TISSUE-TEK OCT 在-80度包埋就行，不知道这样做可以么，固定的作用主要是什么啊

runsong

是先切片后固定还是先固定后切片？