求详细的冷冻切片sample处理protocol

ivantanqi

最近本人要收tissue （tendon and muscle) sample，4 u! ]/ o" f1 j# A- K$ }1 U
打算做一些冰冻切片和石蜡切片，后者比较熟悉，  N* `+ j# g& P3 g4 H* D
前者没有做过，有谁有比较详细的protocol, 特别是关于怎么处理sample, 怎样固定啊，怎样冷冻啊，
% W" `- k" ^+ {) g能够最大限度的保护抗原啊
# r& y9 e: P! [6 ~+ `有经验的，帮帮忙哦，多谢啦。

ivantanqi

最关键的问题是大家在冰冻进OCT前，固定吗？

dulaiyouyu

冰冻切片：4%PFA灌流、后固定24小时，10%、20%、30%蔗糖梯度脱水，OCT包埋，切片。

gqs2872022

组织取材及时放液氮冻存就行了，剩下的交冰冻切片的技术员处理。

aminhair

到中国病理网吧，那里有专业的人。

addlepate

找到冷冻切片机，问用过的人，这个还真没必要做书面功课，8 g2 O7 b! f1 E- I- H2 u: H
前面的固定和脱水就按楼上某位的指导就行了，后面包埋基本是在切片时处理（注意载玻片一般也是需要包埋过的）。

shen_coco

回复 dulaiyouyu 的帖子
0 i$ e3 f* M3 a" v  ]4 |! n
1 }$ z2 d$ }, }, A$ J/ L% M( o需要固定吗？直接包埋行不行啊

dulaiyouyu

回复 shen_coco 的帖子% M: B  y& g" m5 A
$ c3 w1 ?. L& h' D3 F
当然要固定。

shen_coco

dulaiyouyu 发表于 2011-7-23 13:50
* @8 x( `# x6 _( @8 M5 }! }回复 shen_coco 的帖子; U+ g$ Y% o) a% T3 C, {
+ G5 v3 e4 Y# d' ^+ b: j8 n8 M/ ~
当然要固定。

6 X3 ^- @( Z# `- B: E
我听别人说，直接用TISSUE-TEK OCT 在-80度包埋就行，不知道这样做可以么，固定的作用主要是什么啊

runsong

是先切片后固定还是先固定后切片？