求详细的冷冻切片sample处理protocol

dulaiyouyu

冰冻切片：4%PFA灌流、后固定24小时，10%、20%、30%蔗糖梯度脱水，OCT包埋，切片。

dulaiyouyu

回复 shen_coco 的帖子; a7 C) _+ J2 @& @5 n
- M' \0 P; X& h: J" D
当然要固定。

dulaiyouyu

回复 yuanyan2010 的帖子
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2 k4 l8 ^  b0 `8 [一样的，隔壁实验室有人做过睾丸切片。我给的protocol是循环系统的灌流。所以灌流固定好之后，从脑到肝脏到睾丸都可以取出来，蔗糖梯度脱水，然后OCT包埋作冰冻切片。

dulaiyouyu

回复 shen_coco 的帖子  w, L' D' D1 F, ]/ O- B# ^/ {

' i1 P8 k' g- b& q6 ]) Q" L- Q4 e固定的话，我个人认为有2个最主要的作用。其一是将血液替换掉，避免染色时候有干扰。更重要的是将组织的形态固定住，尽量维持在活体时的形态，而不因为体液流失而萎缩。。。。

dulaiyouyu

回复 runsong 的帖子0 P9 `$ M, W7 F
" Q1 U4 L9 w0 ]* ^
固定是为切片做准备。