干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 22634|回复: 5
go

hiPS复苏后不增殖 [复制链接]

Rank: 3Rank: 3

积分
348 
威望
348  
包包
3637  

优秀会员 美女研究员 小小研究员

楼主
发表于 2012-4-9 15:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
hiPS复苏在灭活的CD-1 MEF上,复苏贴壁率比较高,每天换液,我有下面三个问题:
6 f! Q5 B$ Z1 G8 E" o9 {5 J) }1、10天后克隆不增长,并且出现不同程度分化(如前四图),大家觉得我feeder还是哪里有问题?
- T5 j* c& `4 D; B, M) R. A2、有很少的比较规则的克隆,如第5、6图红圈所示,大家看看这些克隆挑留可以吗) M* X' {2 m0 ~: S# n5 J' D% \5 j
3、为什么板上总会有些如最后一图红圈所示的杂碎细胞呢?这些是分化的吗
附件: 你需要登录才可以下载或查看附件。没有帐号?注册
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
669 
威望
669  
包包
1710  

金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2012-4-9 17:04 |只看该作者
回复 573639471 的帖子0 @/ ~. O& j- r
( j8 k3 {9 C7 r) H8 ?5 i0 {
1、个人感觉第三图里克隆看着还行,尤其是那个小的克隆,值得持续观测。) y5 h/ U# n' l7 V, _5 j& F8 @
2、第六图红圈标注的克隆,如果是我的话我可能就不要了,看着就不太像...
0 p) i$ D4 ?, {6 ]3、是分化细胞,感觉有点像倒退回去的EMT过程中的细胞...
  `* B1 q# i4 U" ]/ p& P3 r3 _* Z0 I  X* f5 h) z& F
补充内容 (2012-4-9 17:06):; s+ B  y. q' x2 m
第五图,clone1 左上角那两个克隆我觉得应该好好关注。我有一次复苏iPS就是这些看着小的克隆后来长了起来,一直长了2周才扩起来。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 15 + 30 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 15  包包 + 30   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
889 
威望
889  
包包
3011  

金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2012-5-3 16:43 |只看该作者
第6张图很像是诱导分化的EB,hiPSC一般一周传代一次,最好不要超过10d,因为处理后的饲养层状态最多维持10天
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
118 
威望
118  
包包
257  
板凳
发表于 2012-6-19 15:11 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
你养的细胞分化了  干嘛不提早传代呢?  养了几天了?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
34 
威望
34  
包包
316  
报纸
发表于 2012-6-19 18:07 |只看该作者
检查一下支原体看是否有支原体污染,这个很影响hES的增殖,而且会使细胞分化。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
348 
威望
348  
包包
3637  

优秀会员 美女研究员 小小研究员

地板
发表于 2012-6-19 21:44 |只看该作者
回复 xiaxin1900 的帖子
& o/ o5 f5 o% r7 c) |
! I/ o5 f% M8 _6 O  D据说有支原体污染的环境是绝对养不起来的 果真吗?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-6-15 21:04

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.