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楼主: runsong
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[请教] pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗?   [复制链接]

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发表于 2011-3-11 17:59 |只看该作者
回复 sannia 的帖子
8 C4 H% `7 h4 B' f6 r7 u' N
3 O# F, a$ y0 {5 i我这么做只是因为经费问题,如果经费充足的话最好卖载体,或用慢病毒载体。7 j& `6 R, S3 b6 B' R0 G* Z
用模拟物也很好,不过比较贵,转染试剂最配套另卖。

miRNASelect™ pEGP-mmu-mir-34c Expression Vector.PDF

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发表于 2011-3-11 18:04 |只看该作者
回复 runsong 的帖子
8 n% }: R8 w% f, H: G5 V, A. m* V. U! M
请问你们检测miRNA表达时用的是什么引物,是加poly a还是用颈环引物。但颈环引物有两个系统,不太一样,我发了相关的帖子,不知前辈有何见解。
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发表于 2011-3-11 18:55 |只看该作者
我是加poly A的,你说的那种方法我没有做过。我倒是建议你可以设计两条引物,都试试。
9 K* s, Q1 v5 v8 N- t& c3 D  y我马上要出去度假了,回来后我们可以讨论讨论 呵呵
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发表于 2011-5-5 17:13 |只看该作者
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pri-miRNA克隆的长度大概在500bp左右,前后各延伸200bp.
) J6 e2 p/ |+ Z; A& r6 l8 |请教:miRNA表达时用什么载体?较好的都有哪些?我们现在用pSUPER,想换个载体。
6 Y& R* `0 K- _9 z: u4 t各位前辈不吝赐教。。。
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发表于 2011-11-10 11:31 |只看该作者
回复 anla0 的帖子
4 A- D! f: K" d" l5 J5 e1 U
7 w' t; C. B! p! q$ C% l请问如何找到pri-miRNA的序列呢?这500bp该怎么确定?
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发表于 2012-10-9 20:29 |只看该作者
楼主,我想问问你的microRNA扩增了多少bp啊,还有你说的加密码子是怎么加法,我不太明白
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发表于 2012-10-10 13:36 |只看该作者
回复 runsong 的帖子
( ?' q! }6 r; L4 |) T7 ^2 `( W  z
4 P. t6 k& `( M2 g9 z; F楼主,你发的那个microRNA-34的文章我下不了,能麻烦你传一份给我吗
$ B# j6 [  r* T, V' V1 c

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发表于 2013-5-12 17:35 |只看该作者
我也想构建个
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发表于 2013-8-2 13:16 |只看该作者
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发表于 2013-9-18 12:16 |只看该作者
正有用的,学习一下
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