pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗？

runsong

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9 j- ^, }4 e( u
6 e( n* V* k$ ]谢谢你从前的指点，一个多月前我按照你的方法把载体建好了，定量PCR显示34c上调了9倍（以5s为内参，34c与5s的Delta Ct由9.9上调为6.7），现在正在进一步探求34c诱导的效应。
: M$ Z- C5 P% N9 I- z8 `不知你们照此法得到的结果如何。% M* _' A' q1 C9 M- H) k* ]; W0 X  O* P

深海寂寞鱼

回复 runsong 的帖子8 S: s- Q6 j" A! L
5 V4 V8 T' j4 `; }8 v2 L& F" Q
恭喜你啊。* b& Z: `+ e1 e9 \" l
不知道你是做的顺转还是稳转？
( ^9 g8 T' i8 z我们通常都是做的稳转。不同克隆间的表达水平略有差异。
9 }6 b: N6 c/ v3 P! s一般都是几倍到十几倍。- ~4 [4 H# c- F. c( E2 J
所以好像和你的结果差不多。

sannia

回复 runsong 的帖子$ r2 D+ w( T" f8 b
; K& s. |& U3 ^3 H
你好，我最近也要做这方面的载体。  m# t* v* B. {3 ]% a/ B' y
不知道楼主能不能共享一下质粒的序列，我看看GFP与primiRNA的之间连接序列

runsong

回复 深海寂寞鱼 的帖子
+ F8 N2 g3 k$ s( H+ K0 A: }! `6 c
. S' l" T/ l9 t& [) q9 T5 F2 Z/ |我做的是瞬转，转染效率约为60%，转染后3天收样。你们那里还有做稳转的吗。

runsong

回复 sannia 的帖子
4 v/ e  D4 p: L) Z
. Y8 n  {& S( ]! k( D$ r我是按照深海寂寞鱼的方法做的，附件里有全部资料，不清楚的话再联系我。

runsong

附件

sannia

感谢之至！

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
% y! ~! S9 }0 H2 n7 Q$ f以后多交流

runsong

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以后多交流

runsong

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