pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗？

runsong

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+ s- ^+ S. c% h8 l$ m+ T* p7 T) q; q5 ], D3 y) N5 _- H
谢谢你从前的指点，一个多月前我按照你的方法把载体建好了，定量PCR显示34c上调了9倍（以5s为内参，34c与5s的Delta Ct由9.9上调为6.7），现在正在进一步探求34c诱导的效应。
/ I0 X' ^& M# I不知你们照此法得到的结果如何。
. x  X! b) r7 d" H& e8 T- r

深海寂寞鱼

回复 runsong 的帖子% Q2 r; g( |4 [; o2 |
6 A) P( Z! Y. U$ ^: ?7 _
恭喜你啊。
/ r" Y" G7 Y2 u8 J& H* y* [不知道你是做的顺转还是稳转？9 e- k6 ?6 G( p8 Y" Q$ b; P
我们通常都是做的稳转。不同克隆间的表达水平略有差异。% L7 n( m2 M  F# H9 Z! U' C6 p
一般都是几倍到十几倍。! j: @5 C1 I) h) a. S& C$ }( \1 _
所以好像和你的结果差不多。

sannia

回复 runsong 的帖子
, j( r" y6 C# I7 Z, F1 m# B1 z% x& n3 i) B2 s
你好，我最近也要做这方面的载体。5 H1 n8 D( b4 @# j4 M( l
不知道楼主能不能共享一下质粒的序列，我看看GFP与primiRNA的之间连接序列

runsong

回复 深海寂寞鱼 的帖子9 `/ P1 A' Q$ X: O
6 d4 O; x6 t( S8 K8 d. @
我做的是瞬转，转染效率约为60%，转染后3天收样。你们那里还有做稳转的吗。

runsong

回复 sannia 的帖子, ^+ C$ [9 J7 f& K
. C7 F9 c  d: }& s/ s8 |. ~( c; a
我是按照深海寂寞鱼的方法做的，附件里有全部资料，不清楚的话再联系我。

runsong

附件

sannia

感谢之至！

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用; Q/ z  x, Y  n5 n) x% A9 T7 b6 X4 N
以后多交流

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
& p$ z  s1 ^0 m1 M# I以后多交流

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
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