pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗？

runsong

回复 sannia 的帖子) m: e0 P& `! g0 C6 b
+ P* \/ y' N: d( [5 ?" x' c
我这么做只是因为经费问题，如果经费充足的话最好卖载体，或用慢病毒载体。
0 Q! f$ ^: Y8 D) ^4 |6 p6 P9 j用模拟物也很好，不过比较贵，转染试剂最配套另卖。

runsong

回复 runsong 的帖子
9 |; }! f; a1 W; v( c. F
) l6 c5 h( ^, n6 l请问你们检测miRNA表达时用的是什么引物，是加poly a还是用颈环引物。但颈环引物有两个系统，不太一样，我发了相关的帖子，不知前辈有何见解。

sannia

我是加poly A的，你说的那种方法我没有做过。我倒是建议你可以设计两条引物，都试试。
7 Z  C& m/ R! _1 |我马上要出去度假了，回来后我们可以讨论讨论 呵呵

anla0

pri-miRNA克隆的长度大概在500bp左右，前后各延伸200bp.* q/ W. V3 {8 Y& g
请教：miRNA表达时用什么载体？较好的都有哪些？我们现在用pSUPER,想换个载体。  G% c' {5 G1 H( I: v% R
各位前辈不吝赐教。。。

宗生萱泽

回复 anla0 的帖子" A- N4 w# a. v9 a# u9 I5 K0 l% [! Y

( D2 C! J# |& c/ }请问如何找到pri-miRNA的序列呢？这500bp该怎么确定？

茅草无敌

楼主，我想问问你的microRNA扩增了多少bp啊，还有你说的加密码子是怎么加法，我不太明白

茅草无敌

回复 runsong 的帖子  K1 D' H% e. b6 t* L8 G

% g# a  b+ w$ G# y% m4 j楼主，你发的那个microRNA-34的文章我下不了，能麻烦你传一份给我吗
# E' {9 J7 Y, y- F( Z

wjzpwyz

我也想构建个

datouqionger

正有用的，学习一下