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楼主
发表于 2012-10-25 19:57 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
分离胎盘羊膜,绒毛膜,胎盘小叶。剥除血管,清洗。
; ]3 x7 {* c( Q# i: z+ h8 |分别剪碎,加一型胶原酶和胰酶消化。
$ J; a- V0 [# U  C) R* Y3 Z正在进行中。。。90分钟了,消化不动,求指导。
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沙发
发表于 2012-10-25 20:42 |只看该作者
胶原酶和胰酶浓度?温度?剪碎程度?请详细说明。
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藤椅
发表于 2012-10-25 20:42 |只看该作者
回复 wind789 的帖子
! U  T# ]! K% X% M0 h
6 e  x9 p& f5 N) s' u1 P) G3 U, l温度适宜!建议使用水浴锅!导热比较快!稳定
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板凳
发表于 2012-10-25 20:43 |只看该作者
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建议你直接将胎盘组织切成小碎片组织培养,胶原酶消化的效率不高
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报纸
发表于 2012-10-25 23:02 |只看该作者
建议边消化边摇动  这样酶作用充分一些
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地板
发表于 2012-10-26 11:23 |只看该作者
本帖最后由 452359357 于 2012-10-26 11:42 编辑
- s4 \3 o: I/ f/ \; K4 t' P
, v5 D1 g% ?. V4 t! l3 X8 {还有就是你想提取胎盘里面的什么干细胞 是造血干还是MSC 要是MSC的话 4楼的建议不错 要是造血干的话就再加点分散酶试试 , 放在37℃水浴锅中 酶20-30分钟吹打混匀一次,消化90min即可
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发表于 2012-10-26 12:44 |只看该作者
sdyinong 发表于 2012-10-25 20:43
9 f1 T- H4 N) ^) {8 L建议你直接将胎盘组织切成小碎片组织培养,胶原酶消化的效率不高

* S% H1 A* z$ D) K你好,请问是将胎盘组织的哪一部分剪成小片呢?

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发表于 2012-10-26 12:45 |只看该作者
452359357 发表于 2012-10-26 11:23 " K6 ?6 _5 @' R: {' Y+ K
还有就是你想提取胎盘里面的什么干细胞 是造血干还是MSC 要是MSC的话 4楼的建议不错 要是造血干的话就再加点 ...
4 a$ R. B2 Q5 P& v3 S
主要还是MSC。我试过绒毛干组织块培养,失败。
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发表于 2012-10-26 12:57 |只看该作者
我养过 细胞很杂 主要是MSC
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发表于 2012-10-26 12:59 |只看该作者
回复 wind789 的帖子
4 e0 s+ X4 F0 N/ T+ [: U5 |+ l3 T' R7 d; D* g8 [3 {/ |
如果是MSC的话 羊膜可以直接用组织块培养的 其他的用酶消化比较好 主要是要没的成分 加上分散酶 消化效果会比较好 消化完成后基本都能分离出干细胞的
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